طب انتظامی، جلد ۱۰، شماره ۲، صفحات ۹۹-۱۰۶
عنوان فارسی جداسازی و مشخصه یابی وزیکولهای برون سلولی از نمونه خون انسان: یک روش امیدبخش در بیوپسی مایع
چکیده فارسی مقاله اهداف: وزیکول­های خارج سلولی، تقریباً توسط تمامی سلول­های بدن ترشح می­شوند و حاوی بیومارکرهای ارزشمندی هستند که می­توان از آن در جهت تشخیص زودهنگام انواع بیماری­ها بخصوص در حوزه سرطان بهره برد. نیاز به یک متد تشخیصی سریع و کارآمد با قابلیت کمیت سنجی EVs جداسازی شده که در عین حال قابل اجرا در شرایط کمبود تجهیزات آزمایشگاهی و غیرتهاجمی باشد، می­تواند از جمله ضروریات در جهت پیشبرد مطالعات تشخیصی مبتنی بر EVs باشد. هدف از تحقیق حاضر ارئه روش نسبتا سریع و کارامد به منظور جداسازی EVs از خون به عنوان یک مایع بیولوژیک مهم در انسان است. مواد و روش‌ها: در این مطالعه تجربی با تلفیق دو روش کروماتوگرافی مبتنی براندازه و سانتریفیوژ دور بالا،  EVsدر طی یک ساعت با موفقیت از پلاسما انسان جداسازی شدند. جهت تائید فرایند جداسازی مطابق با معیارهای مایسیو، سه پروتئین غشایی تتراسپینن CD63، CD81،CD9  و یک پروتئین لومنال TG101 به عنوان شاخص¬های پروتئینی مثبت و پروتئین کانکسین به عنوان مارکر منفی به کمک وسترن بلات مورد ارزیابی قرار گرفتند. یافته‌ها: حضور حداکثری مارکرهای مثبت و عدم حضور مارکر منفی در فرکشن­های 7 الی 9 تائید شد. علاوه بر این، توزیع اندازه آنها به کمک تکنیک DLS با میانگین قطر در محدوده 100 نانومتر صورت گرفت. کمیت‌سنجی مقدار محتوای پروتئینی EVs نیز با سنجش BCA انجام شد. نتیجه‌گیری: تحقیق حاضر مبین آن است که تلفیق روش‌های سانتریفیوژ دور بالا و کروماتوگرافی مبتنی بر اندازه به منظور جداسازی EVs از پلاسمای خون افراد بسیار کارامد است.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله وزیکولهای خارج سلولی، جداسازی، نشانگر، کروماتوگرافی مبتنی براندازه، پراکندگی نور پویا
عنوان انگلیسی Isolation and Characterization of Human Blood Extracellular Vesicles: a Promising Method of Fluid Biopsy
چکیده انگلیسی مقاله Aims: Extracellular vesicles (EV) are nanoscale vesicles that were previously thought to be secreted into the bloodstream by apoptotic cells. Today, EVs have been demonstrated to be secreted by almost all cells in the body, which contain valuable biomarkers for early diagnosis of a wide variety of diseases, particularly cancers. Efficient separation of EVs encounter challenges due to the presence of proteins and lipoproteins. Hence, the need for a time-saving and non-invasive diagnostic method with the ability to quantify isolated EVs, which is also applicable to resource-limited situations, can be the major necessities to advance EV-based diagnostic studies. The aim of the present study was to provide a relatively rapid and efficient method for isolating EV from blood as an important biological fluid in humans. Materials & Methods: In this case study, with the combination of size exclusion chromatography and ultracentrifuge, EVs were successfully isolated from human blood plasma samples within an hour. To confirm the isolation process according to MISEV guidelines, three tetraspanin membrane proteins CD63, CD81, CD9, and one luminal protein TG101, were evaluated as positive protein markers and connexin protein as a negative marker by Western blot. Findings: The maximum presence of positive markers and the absence of negative markers in F7 to F9 fractions were confirmed. Additionally, their size distribution evaluation was done using the DLS technique with an average diameter in the range of 100 nm. Quantification of the protein content of EVs was also performed by BCA assay. Conclusion: The present study shows that the combination of high-speed centrifugation and size-based chromatography methods is very effective in isolating EV from the blood plasma of individuals
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله Extracellular vesicles, Isolation, Biomarkers, Size exclusion chromatography
نویسندگان مقاله فائزه شکری | Faezeh Shekari
Royan Institute for Stem Cell Biology and Technology, ACECR, Cell Science Research Center, Department of Stem Cells and Developmental Biology, Tehran, Iran.
موسسه زیست شناسی و فناوری سلول های بنیادی رویان، ACECR، مرکز تحقیقات علوم سلولی، گروه سلولهای بنیادی و زیست شناسی، تهران، ایران

شیرین جلیلی | Shirin Jalili
Research Institute of Police Science and Social Studies, Tehran, Iran.
پژوهشگاه علوم انتظامی و مطالعات اجتماعی، تهران، ایران

فرشته رحمتی | Fereshteh Rahmati
Faculty of Biology, Department of Biochemistry. Islamic Azad University, Tehran, Iran
دانشکده زیست شناسی، دپارتمان بیوشیمی، واحد تهران شمال، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران

نشانی اینترنتی http://jpmed.ir/browse.php?a_code=A-10-386-9&slc_lang=fa&sid=1
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده فناوری‌های مرتبط با طب انتظامی
نوع مقاله منتشر شده پژوهشی اصیل
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات