این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
پژوهش‌های آسیب‌ شناسی زیستی، جلد ۱۲، شماره ۳، صفحات ۹-۱۶
عنوان فارسی ارزیابی روش‏های مولکولی PCR و Xenodiagnosis برای تعیین آلودگی کنه‏های نرم اورنیتودوروس تولوزانی به بورلیا پرسیکا
چکیده فارسی مقاله هدف: تب راجعه کنه‏ای بیماری حاد عفونی است که توسط اسپیروکتی به نام بورلیا پرسیکا ایجاد و توسط کنه‏های نرم اورنیتودوروس تولوزانی منتقل می‏شود. این بیماری در خاورمیانه و نیز مناطق زیادی از کشور ایران دیده می‏شود. یکی از مشکلات موجود درباره این بیماری تعیین آلودگی در کنه‏ها برای تعیین ناقل بیماری است که به روش کلاسیک گزنودیاگنوزیز انجام می‏شود که عبارت است از خون‏دهی کنه‏ها روی حیوان حساس آزمایشگاهی و بررسی میکروسکوپی خون حیوان پس از 7-14 روز، که روشی ناکارامد و طولانی مدت است. در این مطالعه کارایی دو روش مولکولی PCR و کلاسیک گزنودیاگنوزیز برای تعیین آلودگی کنه‏های اورنیتودوروس تولوزانی به بورلیا پرسیکا مقایسه شده است. مواد و روش‏ها: نمونه‏های کنه از مناطق شمال غرب کشور جمع‏آوری و روی خوکچه هندی آلوده به بورلیا خونخواری نمودند. برای آزمایش‏های کلاسیک پس از هضم کامل خون، این کنه‏ها مجدداً روی خوکچه‏های سالم خونخواری نموده و پس از 5 تا 14 روز، آلودگی خون آن‏ها به بورلیا با بررسی‏های میکروسکوپی مشخص شد. برای PCR، DNA بورلیا همراه با DNA کنه‏ها استخراج و به کمک آغازگرهای اختصاصی ژن 16S-rDNA، ژنوم بورلیا تکثیر و سپس تعیین توالی شد. در این مطالعه همچنین تأثیر جنس کنه (ماده و نر)، گذشت زمان و حداقل آلودگی لازم برای عملکرد PCR ارزیابی شد. نتایج: بررسی‏های مولکولی به کمک آغازگرهای اختصاصی ژن 16S-rDNA نشان داد که روش PCR می‏تواند آلودگی را در تمامی کنه‏های آلوده مشخص نماید در حالی که روش کلاسیک قادر به تشخیص آلودگی در (3/13 درصد) نمونه‏های آلوده بود. جنس کنه (ماده و نر) و گذشت زمان پس از خونخواری (بلافاصله تا هضم کامل خون) تأثیری بر نتایج واکنش PCR نداشت. ضمن این‏که وجود یک بورلیا کافی بود تا نتیجه واکنش PCR مثبت شود. نتیجه‏گیری: این مطالعه اولین ارزیابی تشخیص مولکولی عامل تب راجعه بومی به روش PCR در ایران است و به لحاظ سرعت، دقت و کارایی بالا می‏تواند جایگزین روش کلاسیک شود و برای تشخیص آلودگی در ایران و سایر مناطق آلوده در خاورمیانه توصیه شود.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله
عنوان انگلیسی Evaluation of PCR and Xenodiagnosis assays for detection of Borrelia persica in soft ticks Ornithodoros tholozani
چکیده انگلیسی مقاله Objective: Relapsing fever caused by Borrelia persica is an acute tick-borne disease which is transmitted by soft ticks of Ornithodoros tholozani to human. The disease is reported from Middle East and many regions of Iran. Detection of infection is problematic since the suspected infected ticks should be fed on animal hosts such as guinea pigs and subsequently after 7-14 days, the animal blood should be microscopically investigated for Borellia spirochetes on a Giemsa stainined thick smear. This classic method named xenodiagnosis is hard, time consuming, and less reliable. In this study, the application of PCR technique has been examined for detection of Borellia persica in soft ticks of O. tholozani. Materials and Methods: Tick specimens were collected from northwestern Iran and were fed on Borellia persica infected guinea pigs. DNA of the animal blood were extracted and used as target for PCR amplification of 16rDNA gene. Subsequently the products were subjected to sequencing. The effect of tick sex and post digestion as well as the minimum number of spirochetes on the efficiency of PCR were also tested. Results: The xenodiagnosis assay was able to detect infection in only 13.3% of the tick-bitten animal bloods whereas all of these blood specimens were PCR positive against the 16rDNA gene. There wasno difference in results of PCR for male and female of the ticks. Post digestion of infected blood meal in ticks did not affect the efficacy of PCR and the recently-fed samples showed similar results to those of completely gravid ones. A test on the threshold sensitivity of PCR assay indicated that only one spirochete is enough for the primers to anneal and to amplify the target gene. Conclusion: This study describes the first molecular assay for diagnosis of B. persica infected ticks in Iran and due to its high speed, accuracy, and applicability is a substitution method for diagnostic purposes in TBRF foci.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله Borrelia persica, Iran, Ornithodoros tholozani, TBRF
نویسندگان مقاله محمد علی عشاقی | mohammad ali
department of medical entomology, faculty of public health and institute of health research sph amp;amp; ihr , tehran university of medical sciences, tehran, iran
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی تهران (Tehran university of medical sciences)

جواد رفیع نژاد |
department of medical entomology, faculty of public health and institute of health research sph amp;amp; ihr , tehran university of medical sciences, tehran, iran
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی تهران (Tehran university of medical sciences)

نیره چوبدار |
department of medical entomology, faculty of public health and institute of health research sph amp;amp; ihr , tehran university of medical sciences, tehran, iran
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی تهران (Tehran university of medical sciences)

علیرضا برمکی |
department of medical entomology, faculty of public health and institute of health research sph amp;amp; ihr , tehran university of medical sciences, tehran, iran
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی تهران (Tehran university of medical sciences)

norayer پیازک |
department of parasitology, iran institute of pasteur, tehran, iran

فاطمه محترمی |
department of medical entomology, faculty of public health and institute of health research sph amp;amp; ihr , tehran university of medical sciences, tehran, iran
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی تهران (Tehran university of medical sciences)

تقی سطوت |
department of parasitology, faculty of public health and institute of health research sph amp;amp; ihr , tehran university of medical sciences, tehran, iran
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی تهران (Tehran university of medical sciences)

امید بنفشی |
department of health management, kermanshah university of medical sciences, kermanshah, iran
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی کرمانشاه (Kermanshah university of medical sciences)

بهروز تقی لو |
department of health management, zanjan university of medical sciences, zanjan, iran
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی زنجان (Zanjan university of medical sciences)

ناصح ملکی rlm رواسان | maleki ravasan
parasitology amp;amp; medical entomology, school of medical sciences, tarbiat modares university, tehran, iran
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه تربیت مدرس (Tarbiat modares university)

نشانی اینترنتی http://mjms.modares.ac.ir/article_6020_10372652a434ff5f57039a6f3623d83c.pdf
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات