این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
مجله دانشکده پزشکی اصفهان، جلد ۳۶، شماره ۴۶۸، صفحات ۱۱۸-۱۲۳
عنوان فارسی تولید پپتید YY(۳-۳۶) در سیستم بیانی Escherichia Coli با استفاده از پروموتر خود القایی
چکیده فارسی مقاله مقدمه: استفاده از القاگرهای سمی، مانند Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside (IPTG)، در تولید زیست‌داروها بر اساس رهنمودهای سازمان‌های نظارتی ممنوع می‌باشد. از این رو، مطالعه‌ی حاضر با هدف ارزیابی و بررسی امکان استفاده از سیستم‌های بیانی خود القایی برای تولید پپتید YY (3-36) به عنوان یک ماده‌ی اولیه‌ی دارویی (Active pharmaceutical ingredient یا API) در سیستم بیانی Escherichia coli انجام شد. روش‌ها: توالی پروموتر خود القایی با استفاده بانک‌های اطلاعاتی به دست آمد. سپس، توالی مورد نظر در وکتور pUC18 سنتز شد. ژن کد کننده‌ی YY (3-36) نیز با سنتز پرایمر در انتهای’3 پروموتر قرار داده شد. البته، جهت بیان خارج سلولی، یک توالی 22 اسید آمینه‌ای سیگنال ترشحی آنزیم آسپاراژیناز در قسمت بالادستی ژن پپتید مورد نظر قرار داده شد. با این پروموتر، از نرم‌افزارها پس از آماده‌سازی باکتری Escherichia coli از وکتور pUC18 برای انتقال ژن به باکتری استفاده شد. سپس، با مقایسه‌ی بیان ژن پپتید در سیستم بیانی pET22 به عنوان شاهد مثبت، بیان پپتید در دو حالت خودالقایی و استفاده از IPTG با استفاده از ژل الکتروفورز بررسی گردید. یافته‌ها: میزان بیان با پروموتر خود القاگر در مقایسه با شاهد مثبت (IPTG با غلظت 1 میلی‌مولار) مناسب بود. نتیجه‌گیری: یافته‌های مطالعه‌ی حاضر حاکی از سهولت و اقتصادی بودن کاربرد پروموتر انتخابی در تولید زیست‌داروهای با ارزش افزوده‌ی بالا می‌باشد.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله باکتری Escherichia coli، پپتید YY، پروموتر،
عنوان انگلیسی Production of YY Peptides in the Escherichia Coli Expression System Using Self-Induction Promoter
چکیده انگلیسی مقاله Background: Application of toxic inducers, i.e. isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside (IPTG), for production of biopharmaceuticals has been prohibited by regulatory agencies. Here, we sought to evaluate the feasibility of a self-induced expression system for production of YY (3-36) peptide as an active pharmaceutical ingredient (API) in the Escherichia coli expression system. Methods: The sequence of self-induced promoter was obtained from Data banks, and synthetized in pUC18 vector. The nucleotide sequence of YY (3-36) was inserted downstream of the promoter, after the 22 residue of asparaginase II signal sequence. The expression of the peptide was compared with pET21 harboring the same construct under isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside induction in sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE). Findings: The expression of target peptide was comparable with isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside (1 mM) expressed peptide. Conclusion: Our results demonstrate the ease and economical application of used self-induced promoter as an alternative system in production of high value added biopharmaceuticals.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله Escherichia coli,Peptide YY,Promoter
نویسندگان مقاله امیرحسین مومن |
استادیار، گروه زیست‌فن‌آوری سامانه‌ای، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست‌فن‌آوری، تهران، ایران

بیژن بمبی |
استادیار، گروه میکروبیولوژی، دانشکده‌ی علوم پایه، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد کرج، کرج، ایران

ناصر هرزندی |
استادیار، گروه میکروبیولوژی، دانشکده‌ی علوم پایه، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد کرج، کرج، ایران

اعظم حدادی |


نشانی اینترنتی http://jims.mui.ac.ir/index.php/jims/article/view/8870
فایل مقاله اشکال در دسترسی به فایل - ./files/site1/rds_journals/103/article-103-582192.pdf
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده مقاله پژوهشی
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات