Journal of Reproduction and Infertility، جلد ۴، شماره ۴، صفحات ۲۹۵-۳۰۶
عنوان فارسی تاثیر هورمونهای r‏FSH و تستوسترون بر بلوغ اسپرماتید گرد موشی در سیستم هم‌کشتی سلول‌های Vero
چکیده فارسی مقاله اسپرم‌سازی یک فرآیند سنجیده و دقیق است که در سن بلوغ آغاز شده و در سراسر زندگی تولید مثلی ادامه می‌یابد. سلول‌های ژرمینال در محیط کشت تحت شرایط خاصی قادر به تمایز حین میوز و بعد از آن هستند. سیستم‌های هم‌کشتی در حفظ سلول‌های سازنده اسپرم و روند اسپرم‌سازی نقش مهمی داشته و امکان حمایت از روند اسپرم‌سازی را فراهم می‌نماید. از این رو از این سیستم‌ها جهت بلوغ سلولهای ژرمینال و غلبه بر توقف تمایز سلول‌های سازنده اسپرم استفاده می‌شود. هورمون‌های FSH و تستوسترون نیز در شروع و بقاء اسپرم‌سازی مهم بوده و کاهش آنها سبب نقص در اسپرم سازی در محیط In Vivo می‌گردد. از آنجا که همراهی سیستم هم‌کشتی با هورمون‌ها در مطالعات انجام شده وجود نداشت در این پژوهش، اثرات دو سیستم هم‌کشتی با سلولVero و سیستم هم‌کشتی با سلولVero حاوی هورمونهای r‏FSH و تستوسترون بر بلوغ سلول‌های اسپرماتید گرد مورد بررسی قرار گرفت. به‌ این منظور سوسپانسیون سلولی از بیضه موش نژاد NMRI با سن 12-8 هفته تهیه و به سه قسمت تقسیم گردید. یک قسمت در محیط DMEM حاوی سرم (گروه شاهد)، قسمت دیگر بر روی تک لایه سلول Vero (آزمون 1) و بخشی نیز در محیط حاوی تک لایه سلول‌های Vero به اضافه هورمون‌های rFSH و تستوسترون(آزمون2) به مدت 96 ساعت کشت داده‌شد. تعداد سلول‌های اسپرماتیدگرد، اسپرماتیدهای در حال طویل شدن و اسپرماتیدهای طویل شده قبل از کشت و همچنین روزانه به مدت 96 ساعت با استفاده از میکروسکوپ نوری بررسی و ثبت گردید. میزان درصد زنده ماندن انواع سلول‌های اسپرماتید نیز در طی ساعات ذکر شده، با استفاده از آزمون تریپان بلو ارزیابی شده و نتایج حاصل توسط آزمون آماری repeated measure ANOVA مقایسه شد. نتایج حاصل حاکی از آن بود که در سیستم هم‌کشتی Vero در 24 ساعت اول کشت تعداد سلول‌های اسپرماتید در حال طویل شدن نسبت به گروه شاهد افزایش معنی‌دار نشان داد (001 0/0P< ). در سیستم هم‌کشتی حاوی هورمون‌های rFSH و تستوسترون نیز پس از 24 و48 ساعت کشت، به ترتیب تعداد سلول‌های اسپرماتید در حال طویل شدن و طویل شده نسبت به گروه شاهد افزایش معنی‌دار داشت( 0001/0P<)؛ ولی پس از سپری شدن زمان‌های فوق، به مرور تعداد انواع سلول‌های اسپرماتید کاهش یافت. از نظر تعداد سلول‌های اسپرماتید در‌حال طویل شدن در محیط کشت تفاوت معنی‌دار بین گروه‌های آزمون مشاهده نشد. درتمامی گروه‌ها میزان درصد زنده ماندن سلول‌های اسپرماتید در طول مدت زمان کشت، کاهش داشت و در گروه‌های آزمون به‌دلیل اثرات مثبت سیستم‌های هم‌کشتی وهورمون‌ها حیات سلول‌ها با درصد بالاتری حفظ شد. در مجموع نتایج این تحقیق نشان داد که بلوغ سلول‌های اسپرماتید گرد در هر دو سیستم هم‌کشتی و هم‌کشتی- هورمون حاصل می‌شود و سلول‌ها برای مدت زمان کوتاهی (حداکثر 48 ساعت) قادر هستند که مراحل تمایزی را پشت سر گذارند. لازم به ذکر است که از جهت زنده ماندن در محیط کشت و همچنین بلوغ، سیستم هم‌کشتی که به آن هورمون افزوده شده باشد بهتر عمل می‌کند.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله
عنوان انگلیسی The effects of rFSH and Testosterone on in vitro maturation of mouse round spermatid in co-culture with Vero cells
چکیده انگلیسی مقاله Co-culture systems have important roles in maintenance of spermatogenic cells and process of spermatogenesis. These systems are used for in vitro maturation of germ cells and overcome on differentiation arrest of spermatogenic cells. FSH and Testosterone hormones are important in initiation and maintenance of spermatogenesis. Lack of these hormones causes spermatogenesis deficiency in vivo. In this study, the effects of both co-culture system with Vero cell and co-culture supplemented with rFSH and Testosterone were determined on maturation of round spermatids. Cell suspension was isolated from testis of NMRI male mice (8-12 weeks old) and divided into three parts. Suspensions in three groups include: control (culture on DMEM with 10% FBS), experimental 1 (culture on monolayer of Vero cell) and experimental 2 (culture on monolayer of Vero cell supplemented with rFSH and Testosterone), were cultured for 96-hours. The numbers of round, elongating and elongated spermatids, before and after of culture were recorded for 96-hr using light microscope. Survival rates of all kind of spermatids were evaluated using trypan blue test and the results of each group were compared statistically by repeated measure ANOVA test. The results of this study showed that in co-culture system on the first 24-hr, the number of round spermatid cells were reduced but elongating spermatid cells increased significantly(P< 0.0001). In co-culture system supplemented with rFSH and Testosterone, the numbers of elongated and elongating spermatid cells increased significantly after 24 and 48 hours respectively (P< 0.001) but after that the number of all kind of spermatid cells were reduced. Viability rates of all kinds of spermatid cells reduced during 96-hours culture and there were no significant differences. In conclusion, the results of this study confirms that round spermatid cells by using of co-culture system with and without hormones can progress into elongating over a short period (maximum 48 hours). Vero cell culture supplemented with rFSH and Testosterone can support in vitro maturation and viability of spermatogenic cells better than Vero cells without hormones.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله
نشانی اینترنتی http://www.jri.ir/article/133
فایل مقاله اشکال در دسترسی به فایل - ./files/site1/rds_journals/128/article-128-377102.pdf
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات