|
علوم پیراپزشکی و بهداشت نظامی، جلد ۱۱، شماره ۳، صفحات ۲۸-۳۳
|
|
|
عنوان فارسی |
بررسی بیان پروتئینهای P۱۶ و DAPK در ردهی سلولی لوسمیک HL۶۰ در مجاورت با آلکالوئید گیاهی |
|
چکیده فارسی مقاله |
مقدمه: تغییرات اپیژنتیک و از آن جمله متیلاسیون DNA در ناحیه پروموتور ژنهای سرکوبگر تومور به عنوان یکی از مهمترین مکانیسمهای ایجاد بدخیمیهای خونی مطرح است. امروزه استفاده از مواد طبیعی که دارای اثر هایپومتیلاسیون بر DNA میباشند مورد توجه فراوان قرار گرفته است. Harmine یکی از آلکالوئیدهای مشتق از گیاه اسپند است که دارای خاصیت هیپومتیله کنندگی و ضدتکثیری بر روی رده های سلولی لوسمیک میباشد. از آنجائی که ژنهای P16 و DAPK بعنوان ژنهای سرکوبگر تومور در برخی بدخیمیهای خونی بصورت هایپرمتیله میباشند، لذا در این مطالعه تأثیر آلکالوئید گیاهی Harmine بر تکثیر رده سلولی HL60 و بیان این دو ژن در این رده سلولی بررسی شد تا گامی در جهت روشن شدن مکانیسم اثر این داروی گیاهی و استفاده از مواد طبیعی در درمان سرطانهای خون برداشته شود. مواد و روشها: رده سلولی لوسمیک HL-60 در فلاسک حاوی محیط کشت RPMI، سرم جنینی گوساله، پنیسیلین و استرپتومایسین در دمای 37 درجه و دی اکسید کربن 5 درصد به مدت 5 روز کشت داده شد. تأثیر غلظتهای مختلف Harmine بر تکثیر سلولی در مقایسه با 5-azacytidine به روش دستی و با استفاده از لام نئوبار و رنگ تریپان بلو در ساعات مختلف 24 ساعت ، 48 ساعت و 72 ساعت تعیین گردید. بیان ژنهای P16 و DAPK پس از ساخت cDNA و طراحی پرایمرهای اختصاصی در سایت NCBI، با روش Real-time PCR بررسی شد. آنالیز آماری دادهها با نرم افزار SPSS انجام گرفت. یافته ها: نتایج بدست آمده نشان داد که Harmine در تمامی غلظتها موجب کاهش تکثیر سلولی میشود. بطوری که Harmine در غلظتهای g/mlµ 25.6 و 102.4 و پس از 72 ساعت ، تکثیر سلولی را در مقایسه با نمونه کنترل به ترتیب به میزان50 و 78 درصد کاهش داد (p< 0.001). همچنین Harmine موجب افزایش بیانDAPK میشود اما این افزایش به لحاظ آماری فقط در غلظت g/mlµ 102.4 و فقط در مورد DAPK معنی دار است (p< 0.005). بحث و نتیجه گیری: نتایج این مطالعه نشان داد کهHarmine دارای خاصیت ضدتکثیری وابسته به دوز و زمان بر روی رده سلولی لوسمیکHL60 است. همچنین Harmine موجب افزایش بیانDAPK میشود که این مسئله با توجه به نتایج دیگر مطالعات میتواند ناشی از هایپومتیله شدن پروموتور این ژن باشد. مطالعات بیشتر جهت روشنتر شدن مکانیسم اثر Harmine بر سلولهای سرطانی لازم است. |
|
کلیدواژههای فارسی مقاله |
|
|
عنوان انگلیسی |
Effect of Harmine Alkaloid on the Expression of P16 and DAPK in HL60 Leukemia Cell Line |
|
چکیده انگلیسی مقاله |
Introduction: Epigenetic changes such as promoter methylation of tumor suppressor genes (TSGs) is one of the most important mechanisms involved in the development of hematologic malignancies. Harmine is one of the Harmal-derived alkaloids with anti-proliferatory effects on leukemia cell lines. Since P16 and DAPK genes are hypermethylated in some hematologic malignancies, the current study aimed to investigate the effect of Harmine on the expression of these two genes in HL60 Leukemia cell line to take steps towards clarifying the mechanism of it’s anti-proliferatory effect. Methods and Materials: HL60 cells were seeded into 96 well plates containing RPMI medium supplemented with 10% FBS, 1% penicillin or streptomycin, and then incubated at 37°C in a humid environment at 5% CO2. Cell count and viability were determined after 24, 48, and 72 hours in the presence of Harmine and 5-azacytidine. Gene expression analysis was performed by quantitative real time PCR. Finally, statistical analysis was carried out using SPSS software. Results: Based on the results, Harmine suppresses cell proliferation in all concentrations. Comparing the control group, Harmine at 25.6 µg/ml and 102.4 µg/ml concentrations reduces cell proliferation to 50 and 78 percent at 72 hours, respectively (P< 0.001). The results demonstrate that Harmine at 102.4 µg/ml concentration significantly upregulates DAPK expression (P< 0.005). However, its effect was not significant on p16 expression (P>0.05). Discussin and Conclusion: The results indicate that Harmine have inhibitory effect on HL60 leukemia cell line in a dose and time-dependent manner. Furthermore, Harmine can induce DAPK upregulation that might be related to DAPK gene hypomethylation. Further comprehensive and elucidative investigations are needed for better understanding of the Harmine effect on leukemic cells. |
|
کلیدواژههای انگلیسی مقاله |
HL60, Harmine, P16, DAPK |
|
نویسندگان مقاله |
علی نوروزی عقیده | ali noroozi aghide department of laboratory science, faculty of paramedicine. aja university of medical science, tehran, iran گروه علوم آزمایشگاهی، دانشکده پیراپزشکی، دانشگاه علوم پزشکی ارتش، تهران، ایران سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی ارتش (Artesh university of medical sciences)
حامد سلیمانی ثمرخزان | hamed soleimani samarkhazan department of hematology, faculty of paramedicine, tehran university of medical science, tehran, iran گروه هماتولوژی، دانشکده پیراپزشکی، دانشگاه علوم پزشکی تهران، تهران، ایران سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی تهران (Tehran university of medical sciences)
محرم احمدنژاد | moharam ahmadnezhad department of hematology, blood transmission organization, tehran, iran گروه هماتولوژی، سازمان انتقال خون ایران، تهران، ایران سازمان اصلی تایید شده: سازمان انتقال خون ایران (Blood transfusion research center)
|
|
نشانی اینترنتی |
http://jps.ajaums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-44&slc_lang=fa&sid=fa |
فایل مقاله |
اشکال در دسترسی به فایل - ./files/site1/rds_journals/1932/article-1932-347993.pdf |
کد مقاله (doi) |
|
زبان مقاله منتشر شده |
fa |
موضوعات مقاله منتشر شده |
مقالات کامل |
نوع مقاله منتشر شده |
پژوهشی |
|
|
برگشت به:
صفحه اول پایگاه |
نسخه مرتبط |
نشریه مرتبط |
فهرست نشریات
|