|
|
زیست شناسی گیاهی ایران، جلد ۲، شماره ۳، صفحات ۱۳-۲۴
|
|
|
| عنوان فارسی |
جداسازی و همسانه‌سازی (cloning) cDNA ژن منگنز پراکسیداز (mnp) از قارچ خوراکی دکمهای سفید (Agaricus bisporus)، مقدمه‌ای بر دست‌ورزی ژنتیکی |
|
| چکیده فارسی مقاله |
تولید و پرورش قارچ خوراکی، یکی از کاربردهای تجاری فناوری های میکروبی به منظور تبدیل زیستی ضایعات بخش کشاورزی به فرآورده های با ارزش غذایی است. در قارچ خوراکی دکمهای ( Agaricus bisporus ) آنزیم‌های مختلفی از ابتدای رشد میسلیومی تا انتهای دوره میوهدهی، تجزیه ترکیبات لیگنینی را در محیط کمپوست برعهده دارند. یکی از مهمترین این آنزیم‌ها، آنزیم منگنز پراکسیداز است که سهم عمدهای در تجزیه ترکیبات لیگنینی دارد. به منظور انجام مطالعات ملکولی بر روی آنزیم منگنز پراکسیداز در قارچ خوراکی دکمهای سفید نژاد IM008 و آماده نمودن زمینه برای افزایش تولید این آنزیم در قارچ خوراکی دکمهای، اقدام به جداسازی و همسانه‌سازی cDNA ژن کدکننده آنزیم منگنز پراکسیداز گردید. برای این منظور استخراج RNA از میسلیومهای رشد یافته قارچ خوراکی بر روی محیط‌کشت مایع عصاره کمپوست انجام شد و cDNA آن به‌وسیله آنزیم رونوشت بردار معکوس ساخته شد. پس از تکثیر قطعه مورد نظر به‌وسیله واکنش زنجیره‌ای پلیمراز، قطعه تکثیرشده در ناقل pTZ57R/T قرار گرفت و سپس به باکتری E.coli سویه DH5α منتقل گشت. پس از استخراج پلاسمید از باکتری‌های تراریخته، پلاسمید استخراج شده مورد هضم آنزیمی قرار گرفت و در مرحله آخر قطعه تکثیرشده تعیین توالی شد. در نتایج، بلاست توالی نوکلئوتیدی در مکانهای بازهای نوکلئوتیدی با شماره‌های 657 و 850 با توالی ژن mnp موجود در بانک اطلاعاتی NCBI تفاوت داشت که به ترتیب، سبب تغییر اسید آمینه ایزولوسین به والین و اسید آمینه سرین به آلانین در توالی اسیدآمینه قطعه cDNA همسانه شده، میشود. |
|
| کلیدواژه‌های فارسی مقاله |
|
|
| عنوان انگلیسی |
Isolation and cloning of cDNA manganese peroxidase gene (mnp) from white button Mushroom (Agaricus bisporus), introduction to genetic manipulation |
|
| چکیده انگلیسی مقاله |
Mushrooms, in addition to their nutritional values, are currently considered as useful tools for biological of agricultural wastes to useful food products. In the button mushroom (Agaricus bisporus), there are several enzymes which catalyze lignin compounds of the compost during the mycelia growth and the fructification phases. Manganese Peroxidase (MnP), as one of the most important lignin-degrading enzymes, plays a key role in degradation of lignin compounds in the button mushroom. To achieve a high yield of MnP in the A. bisporus, the gene encoding MnP was isolated, characterized and cloned. The total RNA was extracted from the mycelium growing on the liquid compost extract medium, followed by construction of its cDNA by reverse transcriptase. The PCR products were then inserted into the pTZ57R/T cloning vector, and transferred into E. coli (the DH5α strain). Finally, the plasmid was extracted from the transgenic bacteria, followed by enzymatic digestion and nucleotide sequencing. The BLAST analysis revealed two different nucleotides (657 and 850) between the cloned fragment (generated in this research) and the mnp1 (available in the gene bank of NCBI). The difference in the nucleotide positions of 657 and 850 subsequently changed Isoleucine to Valine and Serin to Alanine, respectively. |
|
| کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله |
|
|
| نویسندگان مقاله |
محمد فارسی |
محمد فارسی |
جواد حسن جانپور | hassan جانپور
|
|
| نشانی اینترنتی |
http://ijpb.ui.ac.ir/article_18769_f12b694a958cd64a3217d3fb4e1eef66.pdf |
| فایل مقاله |
اشکال در دسترسی به فایل - ./files/site1/rds_journals/898/article-898-340094.pdf |
| کد مقاله (doi) |
|
| زبان مقاله منتشر شده |
fa |
| موضوعات مقاله منتشر شده |
|
| نوع مقاله منتشر شده |
|
|
|
|
برگشت به:
صفحه اول پایگاه |
نسخه مرتبط |
نشریه مرتبط |
فهرست نشریات
|