این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
مجله دانشکده پزشکی اصفهان، جلد ۳۰، شماره ۲۱۳، صفحات ۱۹۱۱-۱۹۱۸
عنوان فارسی کلون و بیان مولکولی ژن رتپلاز در سلول‌های باکتری اشریشیا کولی با استفاده از پروموتر tac
چکیده فارسی مقاله مقدمه: این مطالعه با هدف کلون و بیان cDNA رتپلاز، داروی ترومبولیتیک مورد استفاده در درمان انفارکتوس میوکارد و سکته ی مغزی، و با کنترل پروموتر tac در سلول های E. Coli (Escherichia coli) طراحی شد. روش ها: ژن رتپلاز با استفاده از پرایمرهای مناسب و طی واکنش زنجیره ای پلیمراز (Polymerase chain reaction یا PCR) تکثیر شد. محصول به دست آمده در پلاسمید pTZ57R کلون گردید. DNA به دست آمده توسط آنزیم های محدودکننده برش داده شد و به درون وکتور بیانی pGEX-5x-1 وارد گردید. وجود قطعه ی واردشده در وکتور بیانی با کمک هضم آنزیمی و تعیین توالی نوکلئوتیدی تأیید شد. بیان رتپلاز موجود در سلول های E. Coli TOP10 با استفاده از افزودن غلظت های 2/0، 5/0 و 1 میکرومول از IPTG (Isopropyl beta-D thiogalactopyranoside) القا شد و سپس تحت آنالیز با SDS-PAGE قرار گرفت. یافته ها: الکتروفورز محصول PCR و همچنین هضم آنزیمی پلاسمید pTZ57R نوترکیب، باند 1068 جفت بازی رتپلاز را نشان داد. آنالیز SDS-PAGE نشان دهنده ی یک باند پروتئین 60 کیلودالتونی بود که در اثر القای بیان با IPTG تولید شده بود. نتیجه گیری: در این مطالعه cDNA رتپلاز با استفاده از پروموتر tac در سلول های E. Coli به طور موفقیت آمیزی کلون و بیان شد.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله رتپلاز، t-PA، پروموتر tac، کلون کردن، اشرشیا کلی
عنوان انگلیسی Molecular Cloning and Expression of Reteplase in Escherichia Coli Using tac Promoter
چکیده انگلیسی مقاله Background: This study was aimed to clone and express the reteplase complementary deoxyribonucleic acid (cDNA), a thrombolytic agent used for the treatment of acute myocardial infarction and stroke, in e scherichia coli using tac promoter. Methods: Reteplase cDNA was amplified using polymerase chain reaction (PCR) with designed primers. The product was then cloned into pTZ57 plasmid. The cloned DNA was digested out and ligated into pGEX-5x-1 expression vector. The presence of the insert was confirmed by restriction digestion and determination of the nucleotide sequence. By using 0.2, 0.5, and 1 mM isopropyl beta-D thiogalactopyranoside (IPTG), reteplase was induced in escherichia coli TOP10 cells and analyzed by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE). Findings: Electrophoresis of PCR product as well as double digested recombinant pTZ57 plasmid showed a 1068 base pair band of reteplase. SDS-PAGE analysis showed a 60 kilodalton band of protein product induced by IPTG. Conclusion: In the present study, reteplase cDNA was successfully cloned and expressed using tac promoter. This vector was used for the optimization of the expression of reteplase in escherichia coli.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله صفیه آقاعبداللهیان | safieh aghaabdollahian
دانشجوی دکترای داروسازی، گروه بیوتکنولوژی دارویی، دانشکده ی داروسازی و علوم دارویی و کمیته ی تحقیقات دانشجویی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی اصفهان (Isfahan university of medical sciences)

محمد ربانی | mohammad rabbani
استاد، گروه بیوتکنولوژی دارویی، دانشکده ی داروسازی و علوم دارویی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی اصفهان (Isfahan university of medical sciences)

کامران قایدی | kamran ghaedi
استادیار، گروه زیست شناسی، دانشکده ی علوم، دانشگاه اصفهان، اصفهان، ایران
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه اصفهان (Isfahan university)

حمید میر محمد صادقی | hamid mir mohammad sadeghi
استاد، گروه بیوتکنولوژی دارویی، دانشکده ی داروسازی و علوم دارویی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی اصفهان (Isfahan university of medical sciences)

نشانی اینترنتی http://jims.mui.ac.ir/index.php/jims/article/view/2115
فایل مقاله اشکال در دسترسی به فایل - ./files/site1/rds_journals/103/article-103-318372.pdf
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده مقاله پژوهشی
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات