این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
مجله دانشکده پزشکی اصفهان، جلد ۳۰، شماره ۲۱۶، صفحات ۲۰۹۱-۲۱۰۲
عنوان فارسی بیان پروتئین M۲ ویروس آنفلوانزای انسانی H۱N۱ در باکتری اشریشیا کلی
چکیده فارسی مقاله مقدمه: پروتئین M2 که یک پروتئین هوموتترامر متصل به غشا با پیوند دی سولفیدی می باشد، در میان همه ی ویروس های آنفلوانزای A به طور کامل حفاظت شده است. به همین دلیل هدف مناسبی برای توسعه ی واکسن آنفلوانزا با محافظت وسیع الطیف می باشد. در این مطالعه پروتئین M2 ویروس آنفلوانزای A در سیستم پروکاریوتی بیان شد. روش ها: ژن پروتئین M2 ویروس آنفلوانزا [A/NewCaledonia/20/99 (H1N1)] پس از تکثیر به روش PCR (Polymerase chain reaction) با استفاده از پرایمرهای اختصاصی و هضم آنزیمی، در وکتور بیانی پروکاریوتی pQE30 جای سازی گردید. پلاسمید نوترکیب pQE30-M2 به سلول مستعد شده E.coli سویه ی M15 منتقل شد و سلول ها در محیط LB مایع واجد آمپی سیلین و کانامایسین بعد از القا با IPTG (Isopropyl thiogalactoside) به صورت کشت شبانه رشد کردند. بیان پروتئین M2 به وسیله ی الکتروفورز روی ژل آکریل آمید و سپس Western blot تأیید شد. یافته ها: نتایج کلونی PCR و هضم آنزیمی و تعیین توالی نشان داد که ژن M2 در وکتور pQE30 به طور صحیح و در قاب خواندنی دنباله ی هیستیدینی کلون شد و تولید پروتئین نوترکیب با استفاده از آنتی بادی اختصاصی ضد پروتئین M2 به روش Western blot تأیید گردید. نتیجه گیری: آزمایشات نشان داد که واکسن های بر پایه ی M2 باعث القای ایمنی وسیع الطیف می شوند و می توانند حیوانات را در برابر چالش کشنده تحت تیپ های چند گانه ی ویروس، محافظت نماید. بنابراین پروتئین M2 پس از تخلیص می تواند به عنوان یک کاندید واکسن در نظر گرفته شود و در مطالعات آینده همراه با ادجوانت های مختلف در مدل های حیوانی مورد ارزیابی قرار گیرد.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله
عنوان انگلیسی Expression of M2 Protein of Human Influenza Virus in Escherichia Coli
چکیده انگلیسی مقاله Background: Influenza A virus is an orthomyxovirus capable of infecting humans. The virus genome consists of eight negative single-strand RNA segments that encode structural and nonstructural viral proteins. M2, a disulfide-linked homotetramer and a membrane-bound protein, is conserved among all influenza A viruses. Therefore, it is an appropriate target for the development of influenza vaccine with broad-spectrum protection. In this study, M2 protein of influenza virus A was expressed in a prokaryotic system. Methods: M2 gene of influenza virus A (New Caledonia/20/99, H1N1) was amplified by polymerase chain reaction (PCR) using specific primers. It was then digested with appropriate enzymes and cloned into the prokaryotic expression vector pQE30. The Escherichia coli (M15) competent cells were transformed with recombinant plasmid (pQE30-M2) and grown in LB broth media overnight after being induced by isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG). The media were supplemented with 50 mg/ml ampicillin and 50 mg/ml kanamycin. Expression of the M2 protein was approved by sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) and western blot analysis. Findings: The results of colony PCR, restriction enzyme digestion, and sequencing revealed that M2 gene was cloned in pQE30 properly in frame to histidine tag. Protein expression was confirmed in western blotting using specific monoclonal anti-M2 antibody. Conclusion: Experiments in animal models have shown M2-based vaccines to induce broad spectrum immunity against various influenza A viruses. Thus, the M2 protein prepared in this study will be a suitable vaccine candidate to be evaluated in further studies on animal models.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله سید محمد علی علوی اصفهانی | seyed mohammad ali alavi esfahani
کارشناس ارشد، گروه میکرب شناسی، دانشکده ی علوم پایه، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد قم، قم، ایران
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه آزاد اسلامی قم (Islamic azad university of ghom)

فاطمه فتوحی | fotouhi f
استادیار، گروه ویروس شناسی، آزمایشگاه تحقیقات آنفلوانزا، انستیتو پاستورایران، تهران، ایران
سازمان اصلی تایید شده: انستیتو پاستور ایران (Pasteur institute of iran)

امیر قایمی |
استادیار، گروه ویروس شناسی پزشکی و ایمنی شناسی، دانشکده ی پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی گلستان، گرگان، ایران

مریم صالح | maryam saleh
کارشناس ارشد، گروه ویروس شناسی، آزمایشگاه تحقیقات آنفلوانزا، انستیتو پاستورایران، تهران، ایران
سازمان اصلی تایید شده: انستیتو پاستور ایران (Pasteur institute of iran)

سیاوش چلبیانی | siavash chalbiani
کارشناس ارشد، گروه میکرب شناسی، دانشکده ی علوم پایه، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد قم، قم، ایران
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه آزاد اسلامی قم (Islamic azad university of ghom)

بهرخ فرهمند |
استادیار، گروه ویروس شناسی، آزمایشگاه تحقیقات آنفلوانزا، انستیتو پاستورایران، تهران، ایران
سازمان اصلی تایید شده: انستیتو پاستور ایران (Pasteur institute of iran)

معصومه توسطی خیری | masoumeh tavassoti kheiri
استادیار، گروه ویروس شناسی، آزمایشگاه تحقیقات آنفلوانزا، انستیتو پاستورایران، تهران، ایران
سازمان اصلی تایید شده: انستیتو پاستور ایران (Pasteur institute of iran)

نشانی اینترنتی http://jims.mui.ac.ir/index.php/jims/article/view/2381
فایل مقاله اشکال در دسترسی به فایل - ./files/site1/rds_journals/103/article-103-318347.pdf
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده مقاله پژوهشی
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات