این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
مجله دانشکده پزشکی اصفهان، جلد ۳۳، شماره ۳۴۹، صفحات ۱۴۷۵-۱۴۸۶
عنوان فارسی افزایش ایمنی زایی ساقه‌ی پروتئین هماگلوتینین ویروس انفلوانزا در همراهی با پروتئین شوک حرارتی Leishmania major، گامی در جهت ساخت واکسن واحد
چکیده فارسی مقاله مقدمه: ویروس انفلوانزا می‌تواند در انسان عفونت حاد تنفسی با شدت‌های متفاوت ایجاد کند که حتی در پاره‌ای از موارد، منجر به مرگ می‌شود. واکسن‌های موجود، شناساگر سر متغیر پروتئین هماگلوتینین است و بنا بر این، نیازمند به‌روزرسانی سالانه می‌باشد. به تازگی، تلاش‌های زیادی در جهت ساخت واکسن‌های وسیع‌الطیف بر مبنای آنتی‌ژن‌های حفاظت شده‌ی ویروس انفلوانزا انجام گرفته است. هدف از این مطالعه، ارزیابی ایمنی‌زایی زیرواحد HA2 ویروس انفلوانزای نوع A در مدل موشی بود. روش‌ها: پروتئین نوترکیب HA2 در باکتری Escherichia coli بیان و استخراج شد و با استفاده از ستون کروماتوگرافی نیکل، تخلیص گردید. جهت حذف نمک‌های اضافی و اوره و بازگرداندن پروتئین به شکل اولیه، از روش دیالیز با شیب اوره کمک گرفته شد. موش‌های BALB/c شش تا هشت هفته‌ای، با پروتئین HA2 تنها و یا همراه با ادجوانت‌های HSP70 221-604 از Leishmania major و یا Freund، به صورت تحت جلدی واکسینه شدند. در ادامه، ایمنی همورال با آزمایش ELISA (Enzyme-linked immunosorbent assay) بررسی گردید و در نهایت، موش‌های هر گروه با ویروس PR8 چالش شدند. یافته‌ها: در موش‌های دریافت کننده‌ی پروتئین HA2، همراه یا بدون ادجوانت، آنتی‌بادی اختصاصی تولید شده بود. موش‌هایی که پروتئین HA2 را همراه با Freund دریافت کرده بودند، آنتی‌بادی اختصاصی با تیتر بالاتری تولید کردند. در حالی که، موش‌های دریافت کننده‌ی HA2 همراه با HSP70، در چالش با ویروس وحشی بهتر محافظت شده بودند. نتیجه‌گیری: پروتئین‌های شوک حرارتی باعث القای پاسخ آنتی‌بادی شده، ایمنی ذاتی را نیز تحریک می‌کنند. نتایج این پژوهش نشان داد که پروتئین HA2 به تنهایی و یا همراه با HSP70 قادر است، موش‌ها را در برابر چالش با دوز کشنده‌ی ویروس محافظت نماید و می‌تواند، به عنوان یک واکسن واحد در نظر گرفته شود.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله
عنوان انگلیسی Immunogenicity Enhancement of Influenza Virus Stalk Domain Using Leishmania Major Heat Shock Protein, One Step Closer to Universal Vaccine
چکیده انگلیسی مقاله Background: Influenza viruses cause acute respiratory infections in humans, which can often be accompanied by pandemics with varying rates of illness and even a fetal end. Current vaccines target the variable globular part of hemagglutinin (HA); so, their effectiveness is limited and they need perpetual updating. To prepare universal vaccine, scientists' effort is focused on conserved antigenic parts of influenza virus such as hemagglutinin stalk domain which is more conserved compare to its globular head. The aim of this study was evaluating the immunogenicity of influenza A (H1N1) HA2 peptide in mouse model. Methods: To prepare HA2 protein, the expression vector encoding the gene of interest (PET-28a/HA2), was transformed into Escherichia coli BL21-DE3 competent cells. Recombinant HA2 protein was extracted and purified using Ni-TED columns under denaturing conditions, refolded and desalted via step-wise dialysis. The HA2 concentration was determined via using Bradford protein assay. Six-week-old BALB/c mice in different groups were immunized intradermally with HA2 alone or supplemented with Freund or Lm.HSP70 221-604 as adjuvants. Two groups were injected with HSP70 and phosphate buffered saline (PBS) as negative controls. Humeral immunity in vaccinated mice was measured using the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA); and finally, mice were challenged with one lethal dose (LD90) of PR8 virus. Findings: The protein expression, extraction and purification stages were confirmed using sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel (SDS-PAGE) electrophoresis. The highest antibody response was measured in mice vaccinated with HA2-Freund, as expected. Specific antibody response in group received HA2-HSP70 was of higher titer than HA2 alone. More over HA2-HSP70 group surprisingly showed higher level of protection against lethal H1N1 (PR8) challenge compared to other groups. Conclusions: It has been proved that HSP70 can induce specific response and innate immunity via stimulating CD8+ T-Cells, CD40, TLR2, TLR4 and cytokine secretion. Our results showed that HA2 alone or supplemented with HSP70 protected mice against lethal influenza challenge and could be considered as a universal vaccine.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله سعیده صادقی نشاط | saeedeh sadeghi neshat
کارشناس ارشد، گروه زیست شناسی، دانشکده ی علوم پایه، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد علوم و تحقیقات، تهران، ایران
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه آزاد اسلامی علوم و تحقیقات (Islamic azad university science and research branch)

بهرخ فرهمند |
استادیار، آزمایشگاه تحقیقات انفلوانزا، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران
سازمان اصلی تایید شده: انستیتو پاستور ایران (Pasteur institute of iran)

زهرا کیان مهر | zahra kian mehr
آزمایشگاه تحقیقات انفلوانزا، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران
سازمان اصلی تایید شده: انستیتو پاستور ایران (Pasteur institute of iran)

سمیه زمانی | somayeh zamani
کارشناس ارشد، آزمایشگاه تحقیقات انفلوانزا، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران
سازمان اصلی تایید شده: انستیتو پاستور ایران (Pasteur institute of iran)

مریم صالح | maryam saleh
کارشناس ارشد، آزمایشگاه تحقیقات انفلوانزا، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران
سازمان اصلی تایید شده: انستیتو پاستور ایران (Pasteur institute of iran)

فاطمه فتوحی | fotouhi f
استادیار، آزمایشگاه تحقیقات انفلوانزا، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران
سازمان اصلی تایید شده: انستیتو پاستور ایران (Pasteur institute of iran)

نشانی اینترنتی http://jims.mui.ac.ir/index.php/jims/article/view/5207
فایل مقاله اشکال در دسترسی به فایل - ./files/site1/rds_journals/103/article-103-317667.pdf
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده مقاله پژوهشی
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات