فصلنامه پژوهشی خون، جلد ۲، شماره ۴، صفحات ۷۳-۸۱
عنوان فارسی تأثیر کیفی هم کشتی سلول‌های کیسه زرده با رده سلولی M۲-۱۰B۴ در حضور و غیاب اریتروپویتین بر تمایز آن‌ها به رده اریتروئیدی
چکیده فارسی مقاله چکید ه سابقه و هدف سلول‌های بنیادی خون‌ساز کیسه زرده به علت تکثیر زیاد و نداشتن آنتی‌ژن‌های وابسته به MHC برای مطالعات هماتوپویتیک مناسب‌تر هستند. با توجه به اثرات مثبت استفاده از سیستم هم کشتی در تمایز سلول‌‌های بنیادی، در این تحقیق سعی شد از رده سلول M2-10B4 به همراه اریتروپویتین برای تمایز سلول‌های بنیادی کیسه زرده استفاده شود. مواد وروش‌‌ها کیسه زرده از موش‌‌های حامله 10 روزه جدا گردید و با استفاده از سرنگ و سرسوزن‌‌های مختلف ( G 19، G 23 و G 27) و آنزیم کلاژناز 1/0% و یا تریپسین 2 5 /0% دارای EDTA 02/0% به سلول‌‌های منفرد تبدیل شدند. سپس از سلول‌های رده M2-10B4 که فعالیت میتوزی آن‌ها با میتومایسین متوقف شده بود برای هم کشتی استفاده شد و به محیط کشت حاوی ng/ml 5 0 فاکتور سلول بنیادی و U/ml 1 اریتروپویتین اضافه و در37 درجه سانتی‌گراد و فشار 5 درصد CO2 نگهداری شد . بعد از گذشت یک هفته رشد و تمایز سلول‌‌ها ، بررسی و سنجش کلنی در محیط نیمه جامد و رنگ آ میزی بنزیدین صورت گرفت. یافته‌‌ها سلول‌‌ها برروی این رده سلولی به‌خوبی رشد و تکثیر ‌یافتند. البته درمحیط حاوی اریتروپویتین، رشد بهتری نسبت به محیط فاقدآن صورت گرفته بود وسلول‌‌های بنزیدین مثبت یا رده اریتروئیدی یبیشتری مشاهده‌ شد. نتیجه گیری می‌توان با انتخاب لایه پشتیبان مثل سلول‌‌های استرومایی مغزاستخوان و به‌کار بردن هورمون اریتروپویتین، درصد بیشتری رده اریتروئیدی به دست آورد، گرچه برای تعیین نوع خون سازی اولیه یا ثانویه نیازبه انجام تحقیقات تکمیلی است. کلمات کلیدی: سلول‌‌های کیسه زرده ، اریتروپویتین ، تمایز‌، سلول‌‌های اریتروئیدی
کلیدواژه‌های فارسی مقاله ،سلول‌های کیسه زرد،اریتروپویتین،تمایز،سلول‌های ارتیروئیدی
عنوان انگلیسی Quality effect of co-culturing of yolk sac cells with M2-10B4 line on their differentiation in the presence and absence of erythropoietin
چکیده انگلیسی مقاله Abstract Background and Objectives The embryonic yolk sac cells have two unique characteristics: high proliferative capacity and lack of MHC associated antigen. According to the positive effects of co-culturing system on the differentiation of stem cells, in this study we evaluate the effect of M2-10B4 stromal cell line and erythropoietin (EPO) on the differentiation of embryonic yolk sac cells to erythroid cells. Materials and Methods The yolk sacs were dissected from 10-day mice and their cells were separated using syring needles and enzyme digestions (0.1% collagenase/20 fetal calf serum (FBS) or 0.25% trypsin – 0.02% EDTA at 37 ° C). The M2-10B4 stromal cells were cultured in the DMEM medium and mitotically inactivated using mitomycin C. These cells were co-cultured with yolk stem cells in the medium containing stem cell factor (50 ng/ml) EPO (1U/ml) and the colony assay of these cells (5 ´ 104 cells/ml) have been done in the presence of interleukin-3 (40 ng/ml), stem cell factor (50 ng/ml) and EPO (1U/ml) in semisolid medium. After 7 days, benzidine staining on the colonies was carried out and positive benzidine colonies were considered as erythroid colonies. Results The colony assay showed that in the presence of EPO the growth of erythroid colonies were better than the other group and they had more benzidine colonies and cells. Conclusions By using the stromal feeder layer such as bone marrow stromal cells and erythropoietin the differentiation and proliferation of YSC was improved however, further studies are needed. Key words : Yolk sac cells, Erythropoietin, Differentiation, Erythroid cells
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله دکتر مژده صالح نیا | m. salehnia
دانشیار دانشگاه تربیت مدرس

طیبه رهبرپور | t. rahbarpour
دانشگاه تربیت مدرس

دکتر مسعود سلیمانی | m. soleimani
دانشگاه تربیت مدرس

نشانی اینترنتی http://www.bloodjournal.ir/browse.php?a_code=A-10-1-27&slc_lang=fa&sid=fa
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده 1
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات