فصلنامه پژوهشی خون، جلد ۱۲، شماره ۳، صفحات ۲۴۴-۲۵۴
عنوان فارسی چگونگی تکوین سلول‌های شبکیه از طریق انتقال ژن PAX۶ به سلول‌های CD۱۳۳+ به دست آمده از بند ناف انسان
چکیده فارسی مقاله چکید ه سابقه و هدف سلول‌های بنیادی CD133+ بند ناف، زیر گروهی از سلول‌های خونساز را تشکیل می‌دهند. ثابت شده که این سلول‌ها از توانایی تمایز خوبی به سمت سلول‌های عصبی برخوردار هستند. ژن PAX6 جزیی از خانواده­ چند ژنی PAX و از فاکتور­های رونویسی است. ژن PAX6 ژن کنترل­کننده اصلی تکامل چشم و اندام­های حسی بافت­های اپیدرمی و عصبی می‌باشد. هدف از این مطالعه، بررسی روند تمایزی سلول‌های CD133+ به دست آمده از بند ناف که ژن PAX6(5a) به آن‌ها انتقال یافته است بود. مواد و روش‌ها در یک مطالعه تجربی، ابتدا سلول‌های تک هسته‌ای خون بند ناف به وسیله فایکول جدا شدند، سپس سلول‌های CD133+ موجود در آن با روش MACS جدا‏‏‏‏‏ ‎ ‏‏ ‎ ‏ ‎ ‏‏‏ ‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏ ‎ْ و در محیط کشت Stem Span کشت داده شدند. سپس به منظور ساخت ویروس، وکتور ناقل ژن PAX6 و وکتورهای کمکی( pMD2G ، psPAX2 ) به سلول‌های HEK293T ترانسفکت شدند. پس از تغلیظ ویروس و تیتر کردن آن، سلول‌های CD133+ با تیتر مطلوب ویروس آلوده شدند. سلول‌های حاوی ویروس مورد نظر، از نظر وجود پروتئین‌های PAX6 ، Rhodopsin ، Chx10 ، Thy1 و Nestin توسط روش ایمنوسایتوشیمی ارزیابی شدند. یافته‌ها پس از دو هفته پروتئین‌های Thy-1 ، Chx10 ، Nestin و PAX6 در سلول‌های آلوده شده بیان شدند. هم چنین بیان مارکرهای Rhodopsin و Nestin در سلول‌های کنترل مشاهده شد. نتیجه‌گیری نتایج حاصل از این مطالعه بیانگر تمایز سلول‌های CD133+ به سلول‌های پروژنیتوری عصبی و سلول‌های شبه عصبی شبکیه از جمله سلول‌های گانگلیونی می‌باشد.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله کلمات کلیدی ، پروتئین PAX6 ، آنتی‌ژن CD133 ، خون بند ناف
عنوان انگلیسی Retinal cells development through transfection of CD133+ HSC derived from human cord blood by PAX6 master gene
چکیده انگلیسی مقاله Abstract Background and Objectives Cord blood CD133+ stem cells are highly proliferative primitive hematopoietic progenitors. These cells can also differentiate to other cells especially neural cells. The PAX6 gene belongs to a family of genes that play a critical role in the formation of tissues and organs during embryonic development. The PAX6 protein is thought to activate genes involved in the formation of the eyes, brain and spinal cord (central nervous system), and the pancreas. The purpose of this study was to assess PAX6 (5a) gene transfer in cord blood CD133+ stem cells and evaluate its effect on differentiation. Materials and Methods In this experimental study, cord blood stem cells were collected and mononuclear cells isolated by ficoll then, CD133+ cells were obtained using the CD133 MicroBead Kit in combination with the autoMACS Separator. These cells were cultured in Stem Span media. Next, HEK293T packaging cells were co-transfected with PLEX-MCS, PsPAX2, and pMD2G by calcium phosphate method. Lentiviral vectors were collected and concentrated. The appropriate amount of viruses was used to infect CD133+ cells. The successful transduced cells were selected by puromycin resistance. After two weeks, the expression of Rhodopsin, CHX10, Thy1, Nestin, and PAX6 proteins was assessed by immunocytochemisrty method. Results Two weeks after infection, the expression of Rhodopsin, CHX10, Thy1, Nestin, and PAX6 proteins were detected in treatment cells and the expression of Rhodopsin and Nestin in control cells. Conclusions The results showed CD133+ cells differentiated into progenitor neural like cells and retinal neural like cells including ganglion like cells.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله Key words, PAX6 protein, CD133 antigen, Cord Blood
نویسندگان مقاله سحر بالاقلی | s. balagholi
مرکز تحقیقات انتقال خون ـ مؤسسه عالی آموزشی و پژوهشی طب انتقال خون و پایگاه منطقه ای آموزشی انتقال خون تهران

صدیقه امینی کافی آباد | s amini kafi abad
مرکز تحقیقات انتقال خون ـ مؤسسه عالی آموزشی و پژوهشی طب انتقال خون و پایگاه منطقه ای آموزشی انتقال خون تهران

زهرا سهیلا سهیلی | z s soheili
استادیار پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و تکنولوژی زیستی
سازمان اصلی تایید شده: پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری

شهرام سمیعی | sh. samiee
مربی مرکز تحقیقات انتقال خون ـ مؤسسه عالی آموزشی و پژوهشی طب انتقال خون و پایگاه منطقه ای آموزشی انتقال خون تهران

حمید احمدیه | h. ahmadiyeh
استاد مرکز تحقیقات چشم دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی (Shahid beheshti university of medical sciences)

مژگان رضایی کنوی | m rezaei kanavi
دانشیار مرکز تحقیقات چشم دانشگاه علوم پزشکی شهبد بهشتی

مهین نیکوگفتار ظریف | m nikougoftar zarif
مرکز تحقیقات انتقال خون ـ مؤسسه عالی آموزشی و پژوهشی طب انتقال خون

نارسیس دفتریان | n. daftarian
دانشیار مرکز تحقیقات چشم دانشگاه علوم پزشکی شهبد بهشتی

نشانی اینترنتی http://www.bloodjournal.ir/browse.php?a_code=A-10-761-1&slc_lang=fa&sid=fa
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده 1
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات