کومش، جلد ۱۴، شماره ۲، صفحات ۱۳۸-۱۴۴
عنوان فارسی کلونینگ و تعیین توالی ژن انتقال‌دهنده هگزوز ۲ (HXT۲) از مخمر ساکارومایسس سرویزیه سویه ایرانی
چکیده فارسی مقاله سابقه و هدف: ساکارومایسس سرویزیه دارای 20 ژن کد‌کننده پروتئین‌های انتقال‌دهنده هگزوز شامل HXT1 ، HXT17 ، GAL2 ، SNF3 و RGT2 می‌باشد. از میان این خانواده ژنی، هفت ژن ( HXT7-HXT1 ) نقش مهمی در فرآیند تولید الکل دارند. هدف این مطالعه شناسایی و جداسازی ژن HXT2 از ژنوم مخمر ساکارومایسس سرویزیه از طریق PCR و کلونینگ آن در وکتور دارای پروموتور بیانی مناسب به منظور پایه‌ای برای طراحی پلاسمید بیانی و نهایتاً مخمر نوترکیب در ایران بود. مواد و روش ‌ ها: در این تحقیق پس از تهیه پرایمرهای اختصاصی، ژن مورد نظر با روش PCR تکثیر یافت و به پلاسمید pTZ57R/T با کمک آنزیم‌های برشی EcoRI و HindIII منتقل گردید. پس از ترانسفورم pTZ57R/THXT2 به درون باکتری حد واسط اشیرشیاکلی، پلاسمید نوترکیب با روش هضم آنزیمی و نرم‌افزاری مورد ارزیابی قرار گرفت. یافته ‌ ها: ژن HXT2 که به وسیله Restriction Enzyme از پلاسمید pTZ57R/THXT2 جدا شده بود دارای اندازه صحیح در الکتروفروز ژل آگاروز می‌باشد. بررسی نرم‌افزاری نشان داد که این ژن پروتئین با وزن مولکولی 840/59 کیلو دالتون را کد کرده و دارای 541 اسید‌آمینه و نقطه ایزوالکتریک آن 3/8 می‌باشد. نتیجه ‌ گیری: در این مطالعه ژن HXT2 از طریق بهینه‌سازی PCR از ساکارومایسس سرویزیه سویه ایرانی جدا و در یک میزبان پروکاریوتیک، کلون شد. این اولین گزارش از جداسازی و کلونینگ این ژن از طریق مهندسی ژنتیک در ایران است که می‌تواند برای کلونینگ در وکتور بیانی به منظور افزایش راندمان تولید الکل طی فرآیند تخمیر الکلی به کار برده شود.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله
عنوان انگلیسی Cloning and DNA sequence analysis of the glucose transporter gene2 from Iranian Saccharomyces cerevisiae
چکیده انگلیسی مقاله Introduction: Saccharomyces cerevisiae has 20 genes that encode hexose transporter proteins including HXT1 to HXT17, GAL2, SNF3 and RGT2. Among these gene families, seven genes (HXT1-HXT7) have important role in alcohol production. The aim of this study was the identification and isolation of HXT2 gene from Saccharomyces cerevisiae genome by PCR technique and cloning into vector containing suitable expression promoter in order to design expression vector as a basis to produce recombinant yeast by transformation. Materials and Methods: After designing specific oligonucleotides primers, fragment gene amplified by PCR. Gene HXT2 inserted into pTZ57R vector by restriction enzymes EcoRI and HindIII and T4 ligase. After transformation of pTZ57R/THXT2 into E.coli, plasmid recombinant analysis considered. The final further analysis by restriction enzymes digestion and software were evaluated. Results: HXT2 gene isolated from pTZ57R/THXT2 has correct size in agarose gel electrophoresis. Electrophoresis analysis showed that this gene has correct size on agarose gel. Software study showed that this gene encode proteins with 59.84 KDa molecular weight having 541 amino acids with isoelectric point 8.3. Conclusion: HXT2 gene by PCR optimization from saccharomyces cerevisiae was isolated and cloned into prokaryotic host. This is the first report of isolation and cloning of this gene by using genetic engineering technique in IRAN that can be used for cloning into suitable expression vector to improve alcohol fermentation yield.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله صالح امیری | saleh amiri
depat. of biotechnology, faculty of agriculture, shahid bahonar kerman university, kerman, iran
دانشگاه شهید باهنر کرمان، گروه بیوتکنولوژی کشاورزی
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه شهید باهنر (Shahid bahonar university)

علیرضا تاری نژاد | tari negad alireza
dept. of biotechnology, faculty of agriculture, azarbaijan shahid madani university, tabriz, iran
دانشگاه شهید مدنی آذربایجان، دانشکده کشاورزی، گروه بیوتکنولوژی
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه شهید مدنی (Azarbaijan shahid madani university)

غلامرضا شریفی سیرچی | gholamreza sharif sirchii
depat. of biotechnology, faculty of agriculture, shahid bahonar kerman university, kerman, iran
دانشگاه شهید باهنر کرمان، گروه بیوتکنولوژی کشاورزی
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه شهید باهنر (Shahid bahonar university)

نشانی اینترنتی http://koomeshjournal.semums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1264-1&slc_lang=fa&sid=fa
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده عمومی
نوع مقاله منتشر شده پژوهشی
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات