مجله میکروب شناسی پزشکی ایران، جلد ۲، شماره ۳، صفحات ۲۵-۳۰

عنوان فارسی ارزیابی پاسخ آنتی بادی به پروتئین های غشا خارجی بروسلا آبورتوس S۹۹ به روش ELISA
چکیده فارسی مقاله زمینه و اهداف: به پروتئین های غشا خارجی (OMPs) بروسلا به عنوان ساختارهای ایمونوژنیک برای طراحی و تولید واکسن زیر واحد بروسلوز انسانی توجه شده است. OMP های بروسلا آبورتوس همراه با سایر اجزا باکتریایی در خرگوش، سنتز سطوح بالای مولکول های IgG ویژه علیه بروسلا را تحریک می کنند. هدف مطالعه ارزیابی پاسخ آنتی بادی به پروتئین های غشا خارجی بروسلا آبورتوس S99 به روش الیزا بود. روش بررسی: OMP ها از گونه صاف بروسلا آبورتوس S99 با استخراج منظم سلول های سونیکه شده به وسیله اولتراسانتریفوژ و پیش هضم با لیزوزیم تخلیص شدند و با کروماتوگرافی تبادل یونی و ژل فیلتراسیون به طور خالص جداسازی شدند. میزان کل پروتئین تخلیص شده توسط دستگاه نانودراپ اسپکتروفتومتر (ND-1000) به طور صحیح و دقیق اندازه گیری شد. با استفاده از روش سدیم دودسیل سولفات پلی آکریل آمید ژل الکتروفورز (SDS-PAGE)، پروفایلی از پروتئین های غشا خارجی به دست آمد، که طبق آن پروتئین ها بر اساس وزن مولکولی از یکدیگر تفکیک شدند. با این روش دسته دوم از پروتئین ها که جزو پورین ها (Porins) هستند و در گونه بروسلا آبورتوس بیشترین گروه OMPها را تشکیل می دهند، تخلیص شدند. سپس سه دسته خرگوش سه تایی طبق یک برنامه ایمونیزاسیون به طور آزمایشگاهی با سه ترکیب مختلف شامل پروتئین های غشا خارجی به تنهایی و همراه با لیپو پلی ساکارید (LPS) و ادجوانت کامل فروند (CFA) ایمونیزه شدند. طبق برنامه زمانبندی شده پس از خون گیری از حیوان،‌ عیار پاسخ آنتی بادی اختصاصی مورد ارزیابی قرار گرفت. یافته ها: نتایج نشان دادند ترکیبی از LPS+Porins و CFA+Porins به عنوان ایمونوژنیک ترین ترکیبات هستند و عیار بالاتری از آنتی بادی را در مدل حیوانی القا می کنند. افزایش عیار آنتی بادی در دو گروه فوق در مقایسه با گروه ایمونیزه شده با پورین، معنی دار بود (P< 0.05). نتیجه گیری: مجموعه پورین ها و LPS بروسلا می تواند ایمنی حفاظتی و طولانی مدت را علیه بروسلا ایجاد کند. این مجموعه احتمالا می تواند برای واکسن زیر واحد جهت پیشگیری از بروسلوز انسانی مورد استفاده قرار گیرد
کلیدواژه‌های فارسی مقاله

عنوان انگلیسی Evaluation of antibodyresponse to outer membrane proteins of Brucella abortus S99 by Enzyme Linked Immunosorbent Assay
چکیده انگلیسی مقاله Background and objectives: Currently, antigenic determinants of Brucella cell wall such as outer membrane proteins (OMPs) and lipopolysaccharide (LPS) are considered as potential candidates to develop subunit vaccines. It has been shown that OMPs of Brucella abortus along with other bacterial components could stimulate synthesis of specific IgG antibody in rabbits. The aim of present study was evaluation of antibody response to OMPs of Brucella abortus S99by ELISA method. Materials and Methods: OMPs were extracted by deoxycholate extraction technique and further purification performed by sequential centrifugation and ultracentrifugation. Protein concentration determined by using the Nano drop ND – 10000. Sodium dodecyle sulfate polyacryl amid gel electrophoresis (SDS – PAGE) was used to produce a profile of OMPs proteins which these were further differentiated on the basis of molecular weight. By using this method, the class II proteins belongs to porins, which comprised the major OMPs in B. abortus were purified. The groups consisted of 3 rabbits were immunized with three different compounds comprises of OMPs only, combined with LPS and combined with complete Freund's adjuvant (CFA). Sera from immunized animals were then evaluated for specific antibody response. Results: the most immunogenic compounds were LPS+ porins and CFA+ porins and could promoted specific antibody response in experimental animals. The level of specific antibodies in rabbits immunized with above mentioned combinations was significantly higher compared to immunized rabbits with porins only (P< 0.05) . conclusion: Based on the results, the combination of LPS+ porins can produce long term protective immunity against Brucella. So it could be probably considered for developing of subunit vaccine for prevention of human brucellosis.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله

نویسندگان مقاله سحر کرمی | sahar karami
department of microbiology, isalmic azad university, karaj branch, iran
بخش واکسن های باکتریایی و تهیه آنتی ژن، مجتمع تولیدی- تحقیقاتی انستیتو پاستور ایران
سازمان اصلی تایید شده: انستیتو پاستور ایران (Pasteur institute of iran)

سیدداور سیادت | seyed davar siadat
bacterial vaccine and antigen preparation unit, research and production complex, pasteur institute of iran, tehran, iran
بخش واکسن های باکتریایی و تهیه آنتی ژن، مجتمع تولیدی- تحقیقاتی انستیتو پاستور ایران
سازمان اصلی تایید شده: انستیتو پاستور ایران (Pasteur institute of iran)

بهمن تبرایی | bahman tabaraie
department of hepatitis and aids, pasteur institute of iran, tehran, iran

سازمان اصلی تایید شده: انستیتو پاستور ایران (Pasteur institute of iran)

داریوش نوروزیان | dariush norouzian
bacterial vaccine and antigen preparation unit, research and production complex, pasteur institute of iran, tehran, iran

سازمان اصلی تایید شده: انستیتو پاستور ایران (Pasteur institute of iran)

ناصر هرزندی | naser harzandi
department of microbiology, isalmic azad university, karaj branch, iran


محمدرضا آقاصادقی | mohammadreza aghasadeghi
department of hepatitis and aids, pasteur institute of iran, tehran, iran

سازمان اصلی تایید شده: انستیتو پاستور ایران (Pasteur institute of iran)

جلال ایزدی | jalal izadi mobarakeh
department of hepatitis and aids, pasteur institute of iran, tehran, iran

سازمان اصلی تایید شده: انستیتو پاستور ایران (Pasteur institute of iran)

محمدرضا رضوی | mohammadreza razavi
department of hepatitis and aids, pasteur institute of iran, tehran, iran

سازمان اصلی تایید شده: انستیتو پاستور ایران (Pasteur institute of iran)

مریم خیراندیش | mayam kheirandish
research center, iranian blood transfusion organization

سازمان اصلی تایید شده: سازمان انتقال خون ایران (Blood transfusion research center)

سیدمهدی سادات | seyed mehdi sadat
department of microbiology, isalmic azad university, karaj branch, iran



نشانی اینترنتی http://www.ijmm.ir/browse.php?a_code=A-10-1-101&slc_lang=fa&sid=fa
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده باکتری شناسی پزشکی
نوع مقاله منتشر شده پژوهشی
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات