|
|
Medical Laboratory Journal، جلد ۷، شماره ۲، صفحات ۱-۶
|
|
|
| عنوان فارسی |
تولید سازه ژنی نوترکیب حاوی قطعه کد کننده هپسیدین انسانی |
|
| چکیده فارسی مقاله |
چکیده مقدمه:هپسیدین یک پپتید ضد میکروبی غنی از سیستئین است که شکل پیش ساز آن از کبد ترشح می شود. این پپتید علیه دامنه وسیعی از باکتری ها، ویروس ها و قارچ ها عمل می کند. هپسیدین همچنین به عنوان اصلی ترین تنظیم گر هومئوستاز آهن بدن شناخته شده است. امروزه تلاش های گسترده ای برای تولیدهپسیدین صورت گرفته است. یکی از سیستم های بیانی یوکاریوتی مورد استفاده برای تولید هپسیدین ، سیستم بیانی باکلوویروس می باشد. تولید سازه ژنی نوترکیب یکی از اصلی ترین مراحل در مسیر تولید هپسیدین در این سیستم بیانی است. روش بررسی: ابتدا RNA تام از سلول های رده HepG2 به عنوان سلول تولید کننده هپسیدین استخراج شده و پس از سنتز cDNA کل، قطعه مربوط به هپسیدین انسانی توسط پرایمر های اختصاصی هپسیدین به روش PCR تکثیر شد. در مرحله بعد این قطعه درون ناقل pTZ57R/T کلون شد. در پایان قطعه مربوطه به روش برش آنزیمی توسط آنزیم های BamHI و ECoRI به درون محل ورود ژن در ناقل pFast BacHT B منتقل شد. یافته ها: قطعه کد کننده هپسیدین انسانی به طور صحیح درون ناقل pTZ57R/T کلون شده و مراحل ساب کلونینگ درون ناقل pFast Bac HT B با موفقیت انجام شد. حضور باند 274 جفت بازی حاصل از تکثیر PCR و برش آنزیمی نشان دهنده صحت مراحل انجام کار بود. نتیجه گیری: بر اساس جستجوهای انجام شده این مطالعه نخستین مورد از تولید سازه ژنی نوترکیب واجد قطعه کد کننده هپسیدین کامل انسانی در کشور است. سازه های ژنی نوترکیب حاصل از این مطالعه می تواند به منظور تولید فرم کامل هپسیدین انسانی در مطالعات آینده مورد استفاده قرار گیرد. واژه های کلیدی : سازه ژنی، هپسیدین ، آهن |
|
| کلیدواژه‌های فارسی مقاله |
بکمید، هپسیدین ، آهن |
|
| عنوان انگلیسی |
Production of Recombinant Bacmid Containing the Coding Sequence of Human Hepcidin |
|
| چکیده انگلیسی مقاله |
Abstract Background and objective: Hepcidin is a cystein-rich antimicrobial peptide, which is secreted by the liver. It fights against wide spectrum of bacteria, viruses and fungi and it is a major regulator of iron homeostasis. Today, scientists have made many efforts on the production of hepcidin. Baculovirus expression system is one of the best eukaryotic expression systems for production of recombinant hepcidin and production of the recombinant vector is one of the most important steps in this expression system. Material & Methods: First, the total RNA was separated from HepG2 cell line as a source of hepcidin expression. Then, after synthesis of total cDNA, human hepcidin sequence was amplified, using specific primers by PCR method. Next, hepcidin sequence was cloned into pTZ57R/T vector. After digestion of recombinant vector using ECoRI and BamHI restriction enzymes, recombinant pFastBac HT B vector containing human hepcidin cDNA was produced. Results: Coding sequence of human hepcidin is correctly cloned into pTZ57R/T vector and sub cloning into pFastBac HT B vector is performed successfully. The presence of a clear band near 274 bp resulted from PCR amplification and restriction enzyme are the confirmation of the cloning of human hepcidin. Conclusion: According to our knowledge, the present study is the first work that focuses on recombinant vector containing coding sequence of human prohepcidin. This recombinant vector can be used for human hepcidin production. Key words: Vector, Hepcidin, Iron |
|
| کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله |
Bacmid, Hepcidin, Iron |
|
| نویسندگان مقاله |
n ندا کیهان ور | n keyhanvar
msc student of medical biotechnology, faculty of advanced medical technologies
دانشکده فناوری های نوین،دانشگاه علوم پزشکی گلستان
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی گلستان (Golestan university of medical sciences)
a علیجان تبرایی | a tabarraei
assistant professor of virology, department of microbiology
y یعقوب یزدانی | y yazdani
assistant professor of immunology, laboratory science research center and infectious diseases research cente
|
|
| نشانی اینترنتی |
http://www.goums.ac.ir/mljgoums/browse.php?a_code=A-10-1-143&slc_lang=fa&sid=fa |
| فایل مقاله |
فایلی برای مقاله ذخیره نشده است |
| کد مقاله (doi) |
|
| زبان مقاله منتشر شده |
fa |
| موضوعات مقاله منتشر شده |
تخصصی |
| نوع مقاله منتشر شده |
تحقیقی |
|
|
|
برگشت به:
صفحه اول پایگاه |
نسخه مرتبط |
نشریه مرتبط |
فهرست نشریات
|