|
|
Medical Laboratory Journal، جلد ۹، شماره ۱، صفحات ۴۵-۵۲
|
|
|
| عنوان فارسی |
طراحی و ساخت سازه ژنی کدکننده فاکتوررشد فیبروبلاستی-۲ متصل به بخش ایمونودامیننت توکسین سودوموناس آئروژینوزا |
|
| چکیده فارسی مقاله |
چکیده زمینه و هدف: توقف رگ زایی تومور، رشد سلول‌های توموری را به طور قابل ملاحظه ای کاهش می‌دهد. در این میان پروتئین فاکتور رشد فیبروبلاست- 2 (bFGF) به عنوان یک فاکتور رگ زایی مهم هدف مناسبی در مهار رگ زایی تومور و درمان سرطان است. هدف این مطالعه طراحی، ارزیابی و ساخت سازه ژنی نوترکیب در جهت بیان کارامد فیوژن پروتئینی است که دارای بخش های ایمونودامیننت توکسین سودوموناس همراه با bFGF است. روش بررسی: چگونگی حضور لینکرهای مختلف، بهینه‌سازی کدون های کد کننده اسیدهای آمینه و افزودن توالی سیگنال جهت افزایش ایمونوژنیسیته فیوژن پروتئین از جمله فاکتورهای مهم بوده که در این طراحی لحاظ گردیده است. پس از حصول اطمینان ازکارآمد بودن قطعه طراحی شده، قطعه نوکلئوتیدی کدکننده برای سنتز در وکتور کلونینگ pUC57 سفارش داده شد. سپس قطعه ژنی در سایت کلونینگ وکتور بیانی pET28-a قرار گرفت. با استفاده از آزمون های تکثیر ژنی و هضم آنزیمی وجود قطعه طراحی شده در وکتور بیانی مورد ارزیابی قرار گرفت. یافته ها: بهینه سازی کدون های کد کننده سازه ژنی منجر به افزایش سازگاری کدون های خوانش از 69/0 به 83/0 شد. همچنین میزان محتوی GC (GC content)پس از بهینه‌سازی از61 به 77/54 کاهش یافت. حضور باند 1214 جفت بازی به روش تکثیرژنی و باند 1029 جفت بازی به روش هضم آنزیمی در الگوی الکتروفورز تأییدکننده فرایند صحیح کلونینگ می‌باشد. نتیجه گیری: براساس مطالعات صورت پذیرفته، این نخستین مطالعه در خصوص طراحی، ارزیابی و ساخت قطعه کد کننده مربوط به فیوژن پروتئینی است که واجد قطعات مربوط به دومین های ایمونودامیننت فاکتور رشد فیبروبلاست-2 و بخش ایمونودامیننت توکسین سودو است. واژه های کلیدی: رگ زایی تومور، بخش ایمونودامیننت توکسین سودوموناس ائروژینوزا، فاکتور رشد فیبروبلاست 2، نرم افزار DNA2 |
|
| کلیدواژه‌های فارسی مقاله |
|
|
| عنوان انگلیسی |
Designing and Construction of Recombinant Plasmid Consisting of Basic Fibroblast Growth Factor and Immunodominant Fragments of Pseudomonas Exotoxin |
|
| چکیده انگلیسی مقاله |
Abstract Background and Objective: the inhibition of tumor-associated angiogenesis can significantly reduce the tumor proliferation. The basic fibroblast growth factor (bFGF), an important angiogenic factor, is considered as a potential therapeutic target for cancer therapy. The purpose of this study was evaluating, designing and construction of new recombinant DNA molecule in order to have efficient expression of a fusion protein consisting of the bFGF and immunodominant epitopes of Pseudomonas toxin. Material and Methods: Different types of peptide linker, codon adaptation index (CAI) and adding signal peptide were considered in designing of immunogenic coding sequence. After software evaluation, the recombinant DNA molecule was ordered in the puc57 cloning vector. Then, coding sequence inserted into the multiple cloning site of pET28-a plasmid. Finally, PCR and enzymatic digestion tests were done for evaluation of recombinant expression vector. Results: Optimization of DNA sequence, codon adaptation index (CAI) increased from 0.69 to 0.83 and GC content decreased from 61 to 54.77. The presence of 1214-bp PCR product and 1029-bp one obtaining from enzymatic digestion confirmed the correction of the cloning process. Conclusion: According to the previous studies, it is the first work for designing, optimizing and synthesis of recombinant DNA consisting of bFGF and immunodominant epitopes of Pseudomonas toxin. Keywords: Tumor angiogenesis, immunodominant epitopres of Pseudomonas toxin, Fibroblast growth factor 2, DNA 2 software |
|
| کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله |
|
|
| نویسندگان مقاله |
h حمید حقیقت فرد | h haghighatfard
msc student of medical biotechnology, faculty of advanced medical technologies, golestan university of medical science, gorgan, iran
دانشگاه علوم پزشکی گلستان، دانشکده فن آوری های نوین
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی گلستان (Golestan university of medical sciences)
y یعقوب یزدانی | y yazdani y
assistant professor of immunology, infectious diseases research center and laboratory science research center, golestan university of medical sciences, gorgan, iran
دانشگاه علوم پزشکی گلستان، دانشکده فن آوری های نوین
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی گلستان (Golestan university of medical sciences)
|
|
| نشانی اینترنتی |
http://www.goums.ac.ir/mljgoums/browse.php?a_code=A-10-1-288&slc_lang=fa&sid=fa |
| فایل مقاله |
فایلی برای مقاله ذخیره نشده است |
| کد مقاله (doi) |
|
| زبان مقاله منتشر شده |
fa |
| موضوعات مقاله منتشر شده |
تخصصی |
| نوع مقاله منتشر شده |
تحقیقی |
|
|
|
برگشت به:
صفحه اول پایگاه |
نسخه مرتبط |
نشریه مرتبط |
فهرست نشریات
|