این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
پژوهش در پزشکی، جلد ۴۲، شماره ۲، صفحات ۷۱-۷۸
عنوان فارسی تولید آنتی‌بادی مرغی ضد زیر واحد B توکسین ویبریو کلرا و راه‌اندازی روش الایزا جهت تشخیص سم‌ ویبریو کلرا
چکیده فارسی مقاله خلاصه سابقه و هدف: با توجه به اهمیت تشخیص سریع سم ویبریو کلرا در نمونه‌هایی مانند آب و یا غذا، در این مطالعه اقدام به طراحی و راه‌اندازی یک روش ایمنواسی برای شناسایی مستقیم سیتوتوکسین B این باکتری، با استفاده از آنتی‌بادی مرغی شده است.  مواد و روش ها: توالی ژنی ctxB در وکتور بیانی pET28a کلون شده و سپس در باکتری BL21 (DE3) بیان گردید. پروتئین‌های نوترکیب حاصله پس از تخلیص با روش ایمنوکروماتوگرافی، به‌صورت درون ماهیچه‌ای به مرغ تزریق و آنتی‌بادی پلی‌کلونال ضد پروتئین CtxB با استفاده از پلی‌اتیلن گلیکول از زرده تخم‌مرغ تخلیص شدند. این آنتی‌بادی‌ها برای طراحی یک روش الایزای ساندویچ مورد استفاده قرار گرفتند. حساسیت آنالیتیک روش طراحی‌شده با استفاده از رقت‌های سریالی پروتئین CtxB نوترکیب مورد ارزیابی قرار گرفت. یافته ها: در ازاء هر لیتر کشت باکتری BL21 (DE3) حاوی پلاسمید دربرگیرنده ژن ctxB، 38 میلی‌گرم پروتئین نوترکیب با خلوص بیش از 95 درصد تولید گردید. تیتر آنتی‌بادی ضد CtxB در خون مرغ‌ ایمیونیزه برابر با 1 به 32.000 بود و میزان 9/50 میلی‌گرم آنتی‌بادی مرغی از هر تخم‌مرغ خالص گردید. روش الایزای طراحی‌شده با این آنتی‌بادی امکان تشخیص CtxB را تا غلظت 33 پیکوگرم بر میلی‌لیتر فراهم نمود. نتیجه گیری و پیشنهادات:  آنتی‌بادی‌های مرغی ضد CtxB تولیدشده در این مطالعه، امکان ایجاد یک روش ایمنواسی را فراهم نمودند که با آن تشخیص سریع و با حساسیت بالای سیتوتوکسین B فراهم می‌گردد. لازم است تا در آینده کارآیی این روش جهت تشخیص سم ویبریو در نمونه‌های محیطی مانند آب و یا مواد غذایی مورد بررسی قرار گیرد.  
کلیدواژه‌های فارسی مقاله ویبریو کلرا، سیتوتوکسین B، ایمنوگلوبولین Y، ایمنواسی
عنوان انگلیسی Production of IgY antibody against Vibrio cholerae cytotoxin B and development of an ELISA for detection of cholera toxin
چکیده انگلیسی مقاله Background: Regarding the importance of rapid detection of cholera toxin in environmental samples, an immunoassay method was developed for direct detection of cytotoxin B. Materials and Methods: The gene sequence of ctxB was cloned to pET28a vector and the recombinant protein was expressed in BL21 (DE3). The recombinant CtxB was purified by affinity chromatography and then used for immunization of chickens. The polyclonal anti-CtxB antibodies were purified from egg yolks by polyethylene glycol. The IgY antibodies were used to develop a sandwich ELISA. Analytical sensitivity of the assay was determined. Results: 38 mg of recombinant CtxB, more than 95% purity, was purified from 1 liter of bacterial culture. The titer of anti-CtxB antibodies in the serum sample of immunized chicken was 1:32,000. The yield of purified IgY was 50.9 mg per egg yolk. The detection limit of the developed ELISA is about 33 pg/ml of recombinant CtxB. Conclusion: Management and control of Vibrio cholerae infection requires the availability of rapid diagnostic tools. The newly developed immunoassay provides a rapid and sensitive method for detection of cytotoxin B of V. cholerae. We plan to evaluate the performance of the developed assay in detection of cholera toxin in environmental and food samples.  
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله علیرضا خبیری | Alireza Khabiri
Pasteur Institute of Iran
انیستیتو پاستور

مهدیه بیات |
Azad University, Karaj Branch
دانشگاه آزاد اسلامی واحد کرج

بهزاد همتی | Behzad Hemati
Azad University, Karaj Branch
دانشگاه آزاد اسلامی واحد کرج

نشانی اینترنتی http://pejouhesh.sbmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-3273-1&slc_lang=fa&sid=1
فایل مقاله اشکال در دسترسی به فایل - ./files/site1/rds_journals/17/article-17-719462.htm
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده ژنتیک مولکولی
نوع مقاله منتشر شده پژوهشی
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات