|
|
مجله دانشگاه علوم پزشکی مازندران، جلد ۲۳، شماره ۱۰۴، صفحات ۲-۱۰
|
|
|
| عنوان فارسی |
مقایسه کمی تولید پروتئین نوترکیب انتهای کربوکسیل نوروتوکسین بوتولینوم A در کشت‌های ناپیوسته و ناپیوسته خوراک‌دهی‌شده باکتری اشرشیا کلی |
|
| چکیده فارسی مقاله |
سابقه و هدف: پروتئین 50 کیلو دالتونی واقع در انتهای کربوکسیل زنجیره سنگین نوروتوکسین کلستریدیوم بوتولینوم تیپ A (BoNT/A-Hc) امروزه برای تولید واکسن نوترکیب علیه بوتولیسم به کار می‌رود. هدف از این پژوهش بررسی تولید این پروتئین نوترکیب در باکتری اشرشیا کلی در کشت‌های با تراکم سلولی بالا (ناپیوسته خوراک‌دهی‌شده) و مقایسه تولید آن با کشت‌های ناپیوسته بود. مواد و روش‌ها: در این مطالعه، رشد باکتری اشرشیا کلی حاوی پلاسمید نوترکیب در محیط M9 اصلاح‌شده با فرایند کشت ناپیوسته بررسی گردید. به منظور افزایش بیان پروتئین نوترکیب، میزان غلظت القاکننده Isopropyl β-D-thiogalactoside و زمان القا در Fermentor با حجم کاری 2 لیتر، به کمک روش آماری Taguchi بهینه گردید. سپس کشت ناپیوسته خوراک‌دهی‌شده با روش خوراک‌دهی‌نمایی با حجم ثابت تا رسیدن به تراکم سلولی بالا انجام گرفت. در پایان میزان بیان پروتئین نوترکیب هدف به کمک روش Bradford و دانسیتومتری ژل SDS-PAGE محاسبه شد. یافته‌ها: در شرایط بهینه‌شده کشت ناپیوسته و ناپیوسته خوراک‌دهی‌شده، به ترتیب مقدار 62 و 486 میلی‌گرم پروتئین نوترکیب BoNT/A-Hc به ازای یک لیتر از محیط کشت حاصل گردید. استنتاج: بر اساس یافته‌های این تحقیق می‌توان نتیجه‌گیری کرد که رسیدن به تراکم سلولی بالا در کشت‌های ناپیوسته خوراک‌دهی‌شده در افزایش بازدهی تولید پروتئین‌های نوترکیب بسیار مؤثر است. |
|
| کلیدواژه‌های فارسی مقاله |
|
|
| عنوان انگلیسی |
A Quantitative Comparison of Recombinant Hc Domain of Clostridium Botulinum Neurotoxin A in Escherichia Coli in Batch and Fed-Batch Cultivations |
|
| چکیده انگلیسی مقاله |
Background and purpose: The 50 KDa protein (50 µg) in carboxylic domain of the neurotoxin heavy chain (BoNT/A-Hc) recognizes surface receptors on target neurons and this fragment contains the principle protective antigenic determinants. Recently, this fragment has been used as a recombinant vaccine candidate for botulism. The study aimed to compare the evaluation of BoNT/A-Hc production in fed-batch (high cell density cultivation) and batch cultivation of recombinant Escherichia coli (E. coli.). Materials and methods: In this research, growth of recombinant E. coli in batch culture was studied. In order to maximize protein expression, induction time and Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside (IPTG) inducer concentration were optimized by the Taguchi statistical method. Then, fed-batch culture was applied to achieve high cell density cultivation. Finally, the recombinant protein expression level was determined. Results: In optimized conditions, 62 and 486 mg/l of soluble recombinant BoNT/A-Hc were produced in batch and fed-batch cultivation. Conclusion: According to the results, high cell density in fed-batch cultivation is a very effective for improve of recombinant proteins productivity. |
|
| کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله |
|
|
| نویسندگان مقاله |
خیراله یاری | kheirollah yari
سید صفاعلی فاطمی | seyed safa ali fatemi
محمود تولایی | mahmood tavallaei
محمدطاهر مرادی | mohamad taher moradi
|
|
| نشانی اینترنتی |
http://jmums.mazums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-2554-3&slc_lang=fa&sid=fa |
| فایل مقاله |
فایلی برای مقاله ذخیره نشده است |
| کد مقاله (doi) |
|
| زبان مقاله منتشر شده |
fa |
| موضوعات مقاله منتشر شده |
|
| نوع مقاله منتشر شده |
پژوهشی-کامل |
|
|
|
برگشت به:
صفحه اول پایگاه |
نسخه مرتبط |
نشریه مرتبط |
فهرست نشریات
|