این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
تحقیقات ژنتیک و اصلاح گیاهان مرتعی و جنگلی ایران، جلد ۲۲، شماره ۲، صفحات ۲۲۵-۲۴۰
عنوان فارسی القاء کالوس و تراریزش ژنتیکی در ارغوان (Cercis griffithii Boiss.) به‌کمک آگروباکتریوم تومه‌فاشینس
چکیده فارسی مقاله ارغوان (Cercis spp.) به‌دلیل ارزش زیبایی‌شناختی، در جنگل‌داری شهری از اهمیت بالایی برخوردار است، اما برخی صفات نامطلوب استفاده از آن را با محدودیت مواجه کرده‌اند که می‌توان آنها را از طریق مهندسی ژنتیک اصلاح کرد. در این مطالعه، ریزنمونه‌های کوتیلدون و ساقه گیاهچه‌های درون‌شیشه‌ای ارغوان در محیط کشت MS حاوی غلظت‌های مختلفی از تنظیم‌کننده‌های رشد به‌منظور القاء کالوس کشت شدند. سویه‌های EHA105 و AGL1 آگروباکتریومتومه‌فاشینس با پلاسمید pCAMBIA2301 ناقل ژن‌های nptII و gus، به‌ترتیب عامل ایجاد مقاومت به آنتی‌بیوتیک کانامایسین و تولیدکننده پروتئین آنزیمی گزارشگر β–گلوکورونیداز، بر پایه دو روش کلرید کلسیم و تریس تراریزش شدند. سپس سلول‌های کالوس و جنین زایگوتی بالغ با تراکم‌های مختلفی از سویه‌های مختلف آگروباکتریومدر دو شرایط خلأ و غیرخلأ تلقیح گردیدند. نتایج نشان داد که افزودن 4/22 و 1/9 میکرومول تو، فور– دی کلروفنوکسی‌استیک اسید (2,4–D) به محیط کشت به‌ترتیب با 92 و 97 درصد، بهترین نتیجه را برای کالوس‌زایی از ریزنمونه‌های کوتیلدون و ساقه به‌دنبال داشت. غلظت بهینه آنتی‌بیوتیک کانامایسین برای انتخاب بافت و سلول‌های تراریخته تعیین شد. همچنین نتایج نشان داد که استفاده از سویه AGL1 با تراکم نوری 8/0 در شرایط خلأ بیشترین درصد تراریختی بدست آمد. سنجش هیستوشیمیایی ژن گزارشگر و تجزیه و تحلیل مولکولی، ادغام ژن انتقالی در ژنوم شاخساره‌های حاصل از رشد جنین و کالوس القاء شده از این شاخساره‌ها را تأیید کرد. سیستم تراریزش آگروباکتریومی که برای اولین بار در این گزارش توصیف شده است می‌تواند مسیری کارآمد را برای تولید درختان C. griffithiiتراریخت با استفاده از جنین زایگوتی به‌عنوان ریزنمونه ارائه دهد.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله
عنوان انگلیسی Callus induction and Agrobacterium tumefaciens– mediated genetic transformation in redbud (Cercis griffithii Boiss.)
چکیده انگلیسی مقاله Redbud (Cercis spp.), has a great importance in urban forestry and landscape architect, due to its ornamental values. But its use is hampered by some unfavorable traits that can be improved by genetic engineering. In vitro grown of cotyledons and stem explants of redbud were cultured on MS basal medium supplemented with different concentrations of growth regulators for callus induction. EHA105 and AGL1 strains of Agrobacterium tumefaciens were transformed with pCAMBIA2301 binary vector, harboring nptII and gus genes conferring kanamycin (Kan) resistance and reporter enzymatic protein of β-glucuronidase activity, respectively, using calcium chloride (CaCl2) and Tris. Calli and zygotic embryo cells were infected with different densities of Agrobacterium strains under vacuum and normal conditions. Addition of 22.4 and 9.1 μM of 2,4-Dicholophenoxy acetic acid (2,4-D) to medium resulted in the highest 92 and 97% callus induction in cotyledon and stem explants, respectively. Optimum concentration of Kan for selecting of transformed shoot and callus was also detected. The results showed that the highest transformation level can be obtained by OD600 = 0.8 of AGL1 strain in vacuum condition. Histochemical analysis of reporter gene, and polymerase chain reaction (PCR) analysis confirmed transfering of the transgene from agrobacterium to embryo-derived plantlets and callus induced from regenerated shoots. The Agrobacterium tumefaciens-transformation procedure described here for the first time may pave an efficient way for generating transgenic C. griffithii trees using zygotic embryos as explants.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله نقی شعبانیان |
دانشیار، دانشکده منابع طبیعی، دانشگاه کردستان
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه کردستان (Kordestan university)

مونا نصیری |
رشناس ارشد، جنگل شناسی و اکولوژی جنگل، دانشکده منابع طبیعی، دانشگاه کردستان
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه کردستان (Kordestan university)

محمد شفیع رحمانی | mohammad shafi
نویسنده مسئول مکاتبات، کارشناس ارشد، بیوتکنولوژی گیاهی، آزمایشگاه بیولوژی جنگل، دانشکده منابع طبیعی، دانشگاه کردستان پست الکترونیک m.rahmani@uok.ac.ir
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه کردستان (Kordestan university)

نشانی اینترنتی http://ijrfpbgr.areeo.ac.ir/article_12226_8f3eb18491d65cc5e2514af77e228861.pdf
فایل مقاله اشکال در دسترسی به فایل - ./files/site1/rds_journals/712/article-712-426539.pdf
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات