این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
فیض، جلد ۱۳، شماره ۳، صفحات ۱۷۴-۱۷۹
عنوان فارسی استخراج و ارزیابی مولکولی پروتئین های عمده غشای خارجی بروسلا آبورتوس S۹۹
چکیده فارسی مقاله خلاصه سابقه و هدف: بروسلا باکتری گرم منفی، کوکوباسیل، هوازی، درون سلولی اختیاری، غیرمتحرک و فاقد اسپور می باشد. که طیف گسترده ای از حیوانات و همچنین انسان را آلوده می نماید. امروزه پروتئین های غشای خارجی (OMPs) بروسلا به عنوان ساختارهای ایمونو‍‍ژنیک جهت طراحی و تولید واکسن زیر واحدی برای پیشگیری از بروسلوزیس انسانی مورد توجه قرار گرفته اند. مواد و روش ها: پروتئین های عمده غشای خارجی از سویه صاف بروسلا آبورتوسS99 از سلول‌های سونیکه شده به واسطه اولتراسانتریفیگاسیون و پیش هضم آنزیمی با لیزوزیم، استخراج و به وسیله کروماتوگرافی تبادل یونی و ژل فیلتراسیون به طور خالص تخلیص شدند. مقدار کل پروتئین تخلیص شده توسط دستگاه نانودراپ اندازه گیری شد. با استفاده از SDS–PAGE، پروفایلی از پروتئین های غشاء خارجی بروسلا آبورتوس S99 به دست آمد که براساس وزن مولکولی از یکدیگر تفکیک شدند. در الگوی الکتروفورتیکی به دست آمده، پورین‌ها تخلیص شدند. در نهایت آزمون پیروژنی و سمیت غیر نرمال طبق پروتکل سازمان بهداشت جهانی روی نمونه‌های تخلیص شده انجام شد. نتایج: غلظت پروتئین های عمده غشای خارجی استخراج شده در این مطالعه برابر mg/ml 27/6 بود که با توجه به الگوی الکتروفورتیک به دست آمده از SDS–PAGE، وزن مولکولی نمونه استخراج شده در محدوده ی 36-38 کیلودالتون می باشد. بر اساس وزن مولکولی محاسبه شده، این پروتئین ها در گروه پورین ها قرار می گیرند. نتیجه ی آزمون پیروژنی و سمیت غیر نرمال روی نمونه‌ها منفی بود. نتیجه گیری: روش به کار رفته در این مطالعه به منظور تخلیص پروتئین های عمده غشای خارجی بروسلا آبورتوس S99 با غلظت بالا روشی مناسب و کارآمد بوده و با استفاده از این روش، پورین های باکتری به صورت اختصاصی قابل استخراج می باشند. نتیجه ی آزمون پیروژنی و سمیت غیر نرمال بی‌زیانی مصرف آنها را در مدل‌های حیوانی و مصارف انسانی تایید می‌نماید.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله
عنوان انگلیسی Extraction and molecular determination of major outer membrane proteins of Brucella abortus S99
چکیده انگلیسی مقاله Background: Brucellosis is one of the five common bacterial zoonoses caused by a gram negative, non-spore forming, and facultative intracellular bacterial organism belonging to the genus Brucella. Although brucellosis is considered as a health problem for both men and domestic animals in many countries, any licensed human vaccine has not been designed and produced for it yet. To overcome the problem, currently, antigenic determinants of Brucella cell wall e.g. outer membrane proteins [OMPs] and lipopolysaccharide [LPS] are considered as potential candidates to develop subunit vaccines. Materials and Methods: Brucella abortus S99 used in the present study is obtained from the standard bacterial collection of Institute Pasteur of Iran. OMPs were extracted by deoxycholate extraction technique and further purification performed by sequential centrifugation and ultracentrifugation. Protein concentration was determined using the Nanodrop ND–10000 spectrophotometery. SDS-polyacrylamied gel electrophoresis (SDS–PAGE) was performed to determine the electerophoretic pattern and the molecular weight of the extracted OMP samples. Results: OMPs concentration of B.abortus S99 has been measured and reported as 6.27 mg/ml. SDS-PAGE analysis indicated one protein band in the range of 36-38 kDa which would be classified as the porins of B.abortus S99. Conclusion: Extraction of B.abortus S99 OMPs with the applied method in the present study produced a satisfactory yield of OMPs. These proteins belonging to the second group of OMPs, called porins.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله Brucella abortus, Bacterial Outer Membrane Proteins, Porins
نویسندگان مقاله سحر کرمی | sahar karami


سید داور سیادت | sayyed davar siadat
department of hepatitis and aids, pasteur institute of iran, tehran, iran
تهران، خیابان پاستور، گروه هپاتیت و ایدز، انستیتو پاستور ایران
سازمان اصلی تایید شده: انستیتو پاستور ایران (Pasteur institute of iran)

بهمن تبرایی | bahman tabaraie


داریوش نوروزیان | daryush norouzian


ناصر هرزندی | naser harzandi


محمد رضا آقا صادقی | mohammad reza aghasadeghi


محمد رضا رضوی | mohammad reza razavi


سید مهدی سادات | sayyed mahdi sadat


علی شریفات سلمانی | ali sharifat salmani


مهدی نجاتی | mahdi nejati


نشانی اینترنتی http://feyz.kaums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-706&slc_lang=fa&sid=fa
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده عمومی
نوع مقاله منتشر شده پژوهشی
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات