مجله تازه های بیوتکنولوژی سلولی - مولکولی، جلد ۱۵، شماره ۵۸، صفحات ۰-۰
عنوان فارسی بررسی اثر سویه پروبیوتیک لاکتوباسیلوس گسری بر القای آپوپتوز در سلول های AGS تیمار شده با وزیکل‌های خارج سلولی هلیکوباکتر پیلوری
چکیده فارسی مقاله سابقه و هدف: عفونت هلیکوباکتر پیلوری بعنوان عامل خطر اصلی مرتبط با گاستریت مزمن و آدنوکارسینوم معده شناخته می شود. وزیکل‌های خارج سلولی از جمله فاکتورهای بیماریزایی کلیدی این باکتری است که در ایجاد التهاب و مهار فرآیند آپوپتوز در سلول‌های میزبان نقش دارد. سویه های پروبیوتیک از جمله گونه های لاکتوباسیلوس می توانند در القای فرایند آپوپتوز سلولی نقش ایفا کنند. این مطالعه با هدف بررسی اثر لاکتوباسیلوس گسری ATCC 33323 بر فرآیند آپوپتوز در سلول‌های AGS تحت تیمار با وزیکل‌های خارج سلولی هلیکوباکتر پیلوری مورد ارزیابی قرار گرفت.
مواد و روش­ ها: وزیکل های خارج سلولی از دو سویه هلیکوباکتر پیلوریبالینی (BY-1 و OC824) جدا شدند. شناسایی مورفولوژی وزیکل های خارج سلولی ها بوسیله میکروسکوپ الکترونی گذاره و تکنیک پراکندگی نور پویا انجام شد. زنده مانی سلول های AGS در حضور مقادیر مختلف وزیکل های خارج سلولی هلیکوباکتر پیلوری و مایع رویی بدون سلول حاصل از کشت  لاکتوباسیلوس گسری بررسی شد. بر اساس سنجشMTT  50 میکروگرم در میلی‌لیتر وزیکل های خارج سلولی هلیکوباکتر پیلوری و 10% حجمی/حجمی از مایع رویی کشت لاکتوباسیلوس گسری برای آزمایش‌ های بیشتر استفاده شد. آپوپتوز با استفاده از آنالیز RT-qPCR برای واسطه‌های کلیدی آپوپتوز ( bax، cas3، cas8، cas9، bcl-2 و nod1)، مورد بررسی قرار گرفت.
یافته­ ها: وزیکل های خارج سلولی هلیکوباکتر پیلوریدر محدوده اندازه 50-200 نانومتر شناسایی شد. بر اساس نتایج سنجش زنده‌مانی سلول‌هایAGS، برای تیمار سلولی از 50 میکروگرم در میلی‌لیتر وزیکل‌های خارج سلولی هلیکوباکتر پیلوری و 10 درصد حجمی/حجمی مایع رویی کشت لاکتوباسیلوس گسری استفاده شد. وزیکل های خارج سلولی هلیکوباکتر پیلوری بیان ژن‌های bax، cas3، cas8، وcas9 را کاهش دادند و بیان bcl-2 وگیرنده nod1 را در سلول‌های AGS در زمان های 12 و 24 ساعت افزایش دادند. در مقابل، مایع رویی لاکتوباسیلوس گسری به طور موثر آپوپتوز مهار شده ی ناشی از وزیکل های خارج سلولی را القاء کرد.
نتیجه­ گیری: مطالعه حاضر نشان داد که مایع رویی لاکتوباسیلوس گسری می تواند به طور موثر آپوپتوز مهار شده ی ناشی از وزیکل های هلیکوباکتر پیلوری را در سلول های AGS القاء کند. تحقیقات بیشتر برای کشف مکانیسم اثر مایع رویی کشت لاکتوباسیلوس گسری و متابولیت های آن بر القاء آپوپتوز مورد نیاز است.

 
کلیدواژه‌های فارسی مقاله هلیکوباکتر پیلوری، وزیکل های خارج سلولی، آپوپتوز، پروبیوتیک، لاکتوباسیلوس گسری.
عنوان انگلیسی Investigating the effect of probiotic strain Lactobacillus gasseri on induction of apoptosis in AGS cells treated with extracellular vesicles of Helicobacter pylori
چکیده انگلیسی مقاله Aime and Background: Helicobacter pylori infection is known as the main risk factor associated with chronic gastritis and gastric adenocarcinoma. Extracellular vesicles are among the key virulence factors of this bacterium, which play a role in inducing inflammation and inhibiting apoptosis process in host cells. Probiotic strains, including Lactobacillus species, can play a role in inducing the process of cellular apoptosis. This study aimed to evaluate the effect of L gasseri ATCC 33323 on the apoptosis process in AGS cells treated with extracellular vesicles of H. pylori.
Materials and Methods: EVs were isolated from two clinical strains of H. pylori (BY-1 and OC824). The morphology of EVs was identified by transmission electron microscopy and dynamic light scattering. The viability of AGS cells was examined in the presence of various amounts of H. pylori EVs and L. gasseri cell-free supernatant (CFS). Based on MTT assay, 50 μg/ml of H. pylori EVs and 10% v/v of L. gasseri CFS were used for further experiments. Apoptosis was investigated using RT-qPCR targeting key apoptosis mediators (bax, cas3, cas8, cas9, bcl-2, and nod1).
Results: H. pylori EVs were identified in the size range of 50-200 nm. Based on the results of cell viability assays in AGS cells, 50 micrograms per milliliter of Helicobacter pylori extracellular vesicles and 10% (v/v) of L. gasseri culture supernatant were used for cell treatment. H. pylori EVs downregulated the gene expression of bax, cas3, cas8, and cas9 and upregulated bcl-2 and nod1 in AGS cells at 12 and 24 h. In contrast, L. gasseri CFS effectively induced cell apoptosis which was inhibited by EVs.
Conclusion: The present study showed that L. gasseri CFS can effectively induce H. pylori EV-inhibited apoptosis in AGS cells. Further research is needed to elucidate the precise function of L. gasseri CFS and its metabolites in induction of apoptosis.


 
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله Helicobacter pylori, extracellular vesicles, apoptosis, probiotics, Lactobacillus gasseri
نویسندگان مقاله زهرا صادق لو | Zahra Sadeghloo
گروه زیست شناسی، دانشکده علوم و فناوری های همگرا، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران

پروانه صفاریان | Parvaneh Safarian
گروه زیست شناسی، دانشکده علوم و فناوری های همگرا، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران

مژده حاکمی والا | Mojdeh Hakemivala
گروه میکروب شناسی، دانشکده پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران

امیر صادقی | Amir Sadeghi
مرکز تحقیقات بیماری های گوارش و کبد، پژوهشکده بیماری های گوارش و کبد، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران

عباس یادگار | abbas yadegar
Food and Waterborne Diseases Research Center, Institute of Gastroenterology and Liver Diseases, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran
مرکز تحقیقات بیماریهای منتقله از آب و غذا، پژوهشکده بیماری های گوارش و کبد، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران

نشانی اینترنتی http://ncmbjpiau.ir/browse.php?a_code=A-10-2013-4&slc_lang=other&sid=1
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده other
موضوعات مقاله منتشر شده سلولی و مولکولی
نوع مقاله منتشر شده مقاله پژوهشی
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات