این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
پژوهش در پزشکی، جلد ۴۸، شماره ۴، صفحات ۰-۰

عنوان فارسی ارزیابی آثار غلظت‌های مختلف ال _ آرژنین برالقای‌کلونی‌زایی سلول‌های بنیادی اسپرماتوگونی منجمد-ذوب شده بز در کشت کوتاه‌مدت
چکیده فارسی مقاله سابقه‌و‌هدف: با توجه به اهمیت توسعه روش­های کشت و انجماد سلول­های بنیادی اسپرماتوگونی به عنوان اساس مطالعه‌های ژنتیکی، طب بازساختی، طراحی حیوانات تراریخته و داروهای نوترکیب، تلاش برای ایجاد یک سیستم کشت مناسب اهمیت فراوانی دارد. هدف از انجام مطالعه حاضر، ارزیابی آثار غلظت­های مختلف اسید­آمینه
ال-آرژنین بر تکثیر اسپرماتوگونی­های منجمد-ذوب شده بز در شرایط آزمایشگاه است.

روش بررسی: مطالعه حاضر تجربی است و پنج بار تکرار انجام شد. سلول­های بنیادی اسپرماتوگونی با استفاده از روش هضم آنزیمی دو مرحله­ای از بیضه­های بزغاله­های نابالغ استخراج و با حذف تمایزی تخلیص شد. پس از انجماد-یخ‌گشایی  در یک دوره کشت 10 روزه در شش گروه آزمایشی شامل گروه شاهد(کشت سلول­ها در محیط پایه DMEM حاوی 1 درصد آنتی‌بیوتیک و 5 درصد سرم جنینی گاو) و تیمار­های 2، 3، 4، 5 و 6 به ترتیب شامل محیط پایه به اضافه غلظت­های 50، 100، 200، 500 و 1000 میکرومول بر لیتر ال-آرژنین، کشت داده شدند. تعداد و مساحت کلونی­های تشکیل شده در روز­های 4، 7 و 10 بررسی شد. داده‌ها با آزمون آنالیز واریانس یک‌طرفه و آزمون تکمیلی توکی در سطح 5 درصد با نرم‌افزار آماری Minitab 16  آنالیز شدند. برای شناسایی سلول‌های  اسپرماتوگونی از آزمون RT_PCR نشانگرهای ID4، BCL6، PGP9.5،  PLZF ، VASA و OCT-4 استفاده شد.
یافته‌ها: درصد حیات سلول‌ها پس از جداسازی و افزودن محلول انجماد به ترتیب 2/6±87/14 و 1/21±80/72 بود که پس از یخ‌گشایی به 1/26±65/38 رسید (P<0.05). تعداد و مساحت کلونی ­های اسپرماتوگونی تشکیل شده در تیمار چهار (غلظت 200 میکرومول ال-آرژنین) با دیگر گروه ­های آزمایشی از نظر آماری تفاوت معناداری داشت(P<0.05). همچنین سلول‌های جدا شده نشانگرهای سطحی مربوط به سلول‌های بنیادی را بیان کردند.
نتیجه‌گیری: احتمالاً افزودن غلظت 200 میکرومول بر لیتر ال-آرژنین به محیط کشت آثار مطلوبی بر القای کلونی­زایی سلول­های منجمد-ذوب شده اسپرماتوگونی بز به صورت کشت کوتاه‌مدت و در شرایط آزمایشگاهی دارد.
 
کلیدواژه‌های فارسی مقاله سلول بنیادی اسپرماتوگونی، انجماد، کشت سلول، ال-آرژنین، بز

عنوان انگلیسی Effect of L-Arginine on growth of frozen-thawed caprine spermatogonial stem cells in short term culture
چکیده انگلیسی مقاله Background and Aim: Developting culture and cryopreservation  methods for spermatogonial stem cells (SSCs) is the foundation for genetic studies, regenerative medicine, production of transgenic animals and recombinant drugs, effort to stablish a suitable culture system for these cells is very important. The aim of this study was to investigate the in vitro effects of different concentrtions of L-Arginine on the proliferation of frozen-thawed caprine SSCs.
  Methods: The present study is experimental and was repeated 5 times.
 The isolated spermatogonial cells were frozen-thawed and cultured in six groups, they were added to basal medium culture (DMEM containing 1% antibiotics and 5% FBS) containing different concentrations of L-arginine (0, 50, 100, 200, 500, and 1000 micromoles per liter of L-arginine), respectively. All experimental groups were cultured for 10 days. The number and surface area of colonies formed were evaluated on days 4, 7 and 10. Expression of spermatogonial genes (ID4, BCL6, PGP9.5, VASA, PLZF, OCT4) in the culture was determined by RT-PCR.
Results: The viability rates of fresh cells before and after the addition of cryoprotectant agent were 87.14±2.6 and 80.72±1.21, respectively which decreased to 65.38±1.26 after the thawing. The number and surface area of spermatogonia colonies in the fourth treatment (200 μmol / l L-arginine) was statistically significantin camparision with other experimental groups (P<0.05). Finally, the isolated cells expressed SSCs surface markers.
Conclusion: Probably, adding of 200 μmol / l L-arginine has a desirable effect on the induction of goat frozen-thawed SSCs colonization in short-term culture.
 
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله Spermatogonia stem cells, Cryopreservation, Cell Culture, Caprine, L- Arginine

نویسندگان مقاله فاطمه نجفی | Fatemeh Najafi
Department of Clinical Sciences, Faculty of Veterinary Medicin, Razi University, Kermanshah, Iran
گروه علوم درمانگاهی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه رازی، کرمانشاه، ایران

پیمان رحیمی فیلی | Peyman Rahimi-Feyli
Department of Clinical Sciences, Faculty of Veterinary Medicin, Razi University, Kermanshah, Iran
گروه علوم درمانگاهی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه رازی، کرمانشاه، ایران

علی اصغر مقدم | Ali Moghaddam
Department of Clinical Sciences, Faculty of Veterinary Medicin, Razi University, Kermanshah, Iran
گروه علوم درمانگاهی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه رازی، کرمانشاه، ایران

طیبه محمدی | Tayebeh Mohammadi
Department of Basic Sciences, Faculty of Veterinary Medicin, Razi University, Kermanshah, Iran
گروه علوم پایه، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه رازی، کرمانشاه، ایران


نشانی اینترنتی http://pejouhesh.sbmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-3834-3&slc_lang=fa&sid=1
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده علوم سلولی( سلولی مولکولی، سلول های بنیادی)
نوع مقاله منتشر شده پژوهشی
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات