این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
مجله دانشگاه علوم پزشکی فسا، جلد ۶، شماره ۳، صفحات ۳۱۱-۳۱۸

عنوان فارسی کلون کردن اپی توپ های خطی تحریک کننده ی لنفوسیت T آنتی ژن EG۹۵ اکینوکوکوس گرانولوزوس در وکتور pGEX۴t۱ و بررسی بیان آن با روش SDS-PAGE
چکیده فارسی مقاله زمینه و هدف: انگل اکینوکوکوس گرانولوزوس عامل بیماری مشترک بین انسان و دام به نام کیست هیداتیک یا هیداتیدوزیس است؛ موفق­ترین واکسن نوترکیب علیه این بیماری از کلون کردن ژن کد کننده آنتی­ژن 25 کیلو دالتونی آن یعنی EG95 در وکتور pGEX می­باشد که ایمنی سلولی و همورال قابل‌توجهی را در گوسفندان ایجاد کرده است اما با توجه به نقش ایمنی سلولی TH1 در غلبه بر این بیماری و نقش اپی­توپ­های خطی در تحریک این نوع سیستم ایمنی جهت بهینه‌سازی شرایط واکسن موجود در مطالعه حاضر تنها توالی کد کننده اپی­توپ­های خطی تحریک‌کننده لنفوسیت T این آنتی­ژن کلون و بیان شد. مواد و روش­ها: با استفاده از نرم‌افزار IEDB توالی کد کننده‌ی اپی­توپ­های خطی آنتی­ژن EG95 پیش­بینی و سنتز شد. تکثیر قطعه موردنظر با PCR انجام و بعد از هضم آنزیمی آن و وکتور pGEX4T1 با آنزیم xhoI، در وکتور با روش شوک حرارتی کلون گردید. کلونی­های مثبت با روش colony PCR با استفاده از پرایمرهای مختلف انتخاب‌شده و بیان پروتئین نوترکیب در سلول BL21 با 10%SDS-PAGE موردبررسی قرار گرفت. نتایج: تکثیر توالی کد کننده اپی­توپ­های EG95 با PCR انجام و قطعه موردنظر در وکتور pGEX4T1 کلون گردید. تأیید پلاسمید نوترکیب با colony PCR و اختلاف اندازه وکتور طبیعی و نوترکیب صورت گرفت. بیان پروتئین نوترکیب آنتی­ژن نیز به‌وضوح با SDS-PAGE مشخص شد. نتیجه­ گیری: قطعه EG95 به‌طور موفقیت­آمیزی در وکتور pGEX4T1 کلون و در سلول BL21 بیان شد.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله واکسن های اپی توپی، لنفوسیت T، آنتی ژن EG95، کیست هیداتیک

عنوان انگلیسی Cloning of linear T-cell epitops of EG95 antigen of Echinococcus granulosus into pGEX4t1 vector and expression analysis by SDS-PAGE
چکیده انگلیسی مقاله Background & Objectives: Echinococcus granulosus causes a common disease between humans and animals that called hydatid cyst or hydatidosis. The recombinant EG95 vaccine based on cloning of the 25 KD oncospheral antigen-Eg95- in pGEX stimulated significant humoral and cellular immunity in sheep, but regarding the effect of TH1cell immunity against this parasite and the influence of the linear T-cell epitopes in stimulating this immunity, only the coding sequence of linear T Cell epitopes of EG95 was cloned in pGEX and analyzed it's expression to optimize the qualification of this available vaccine in this study. Materials & Methods: The coding sequence of EG95 linear epitopes by IEDB software were predicted and synthesized. After PCR, the amplicon and pGEX4T1 were digested by xhoI restriction enzyme, the fragment was cloned into pGEX4T1 by heat shock method, and Positive colonies were selected by direct PCR with specific primers. The recombinant protein expression was evaluated in BL21 cells by 10% SDS-PAGE. Results: The coding sequence of EG95 linear T-cell epitopes was amplified by PCR and cloned into pGEX4T1 vector. The recombinant plasmid was selected with Colony PCR and size difference between intact and recombinant purificated vectors. Recombinant protein expression with high significant concentration was recognized by SDS-PAGE. Conclusion: The EG95 linear T-cell epitopes coding sequence has been successfully cloned into pGEX4T1 vector and expressed into BL21 cells.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله EG95 antigen, Epitope vaccine, Hydatid cyst, T lymphocyte

نویسندگان مقاله رقیه مصری | roghayeh mesri
department of cellular amp;amp; molecular, faculty of biological sciences, kharazmi university, tehran, iran.
گروه آموزشی سلولی و مولکولی، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه خوارزمی، تهران، ایران
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه خوارزمی (Kharazami university)

مجید اسمعیلی زاد | majid esmaelizad
central lab, razi vaccine and serum research institute, karaj, iran.
بخش آزمایشگاه مرکزی، مؤسسه تحقیقاتی واکسن و سرم سازی رازی، کرج، ایران
سازمان اصلی تایید شده: موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی (Razi vaccine and serum research institute)

مژگان احمدزاده | mmozhghan ahmadzadeh
department of cellular amp;amp; molecular, faculty of biological sciences, kharazmi university, tehran, iran.
گروه آموزشی سلولی و مولکولی، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه خوارزمی، تهران، ایران
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه خوارزمی (Kharazami university)

سمیه محمدی | somayeh mohammadi
department of cellular amp;amp; molecular, faculty of biological sciences, kharazmi university, tehran, iran.
گروه آموزشی سلولی و مولکولی، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه خوارزمی، تهران، ایران
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه خوارزمی (Kharazami university)

سید عبدالحمید انگجی | seyed abdolhamid angaji
department of cellular amp;amp; molecular, faculty of biological sciences, kharazmi university, tehran, iran.
گروه آموزشی سلولی و مولکولی، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه خوارزمی، تهران، ایران
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه خوارزمی (Kharazami university)

زهرا یزدان پور | zahra yazdanpour
central lab, razi vaccine and serum research institute, karaj, iran.
بخش آزمایشگاه مرکزی، مؤسسه تحقیقاتی واکسن و سرم سازی رازی، کرج، ایران
سازمان اصلی تایید شده: موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی (Razi vaccine and serum research institute)

سیده فهیمه میر حقگوی جلالی | seyedeh fahimeh mmir haghghouy jali
central lab, razi vaccine and serum research institute, karaj, iran.
بخش آزمایشگاه مرکزی، مؤسسه تحقیقاتی واکسن و سرم سازی رازی، کرج، ایران
سازمان اصلی تایید شده: موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی (Razi vaccine and serum research institute)


نشانی اینترنتی http://journal.fums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1183-1&slc_lang=fa&sid=fa
فایل مقاله اشکال در دسترسی به فایل - ./files/site1/rds_journals/228/article-228-331187.pdf
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده ایمونولوژی
نوع مقاله منتشر شده پژوهشی
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات