|
|
مجله علمی دانشگاه علوم پزشکی رفسنجان، جلد ۴، شماره ۴، صفحات ۳۱۲-۳۱۹
|
|
|
| عنوان فارسی |
تولید و خالص‌سازی آنزیم پروتئاز قلیایی از باسیلوس قلیا‌دوست جدا شده از خاک |
|
| چکیده فارسی مقاله |
چکیده زمین ه و هدف: پروتئازها جزو مهم‌ترین آنزیم‌های صنعتی هستند پروتئازهای قلیایی در ترکیب شوینده‌ها استفاده می‌شوند. از آن‌جایی که مقاومت در برابر حرارت و محیط قلیایی دو خصوصیت مهم آنزیم‌ها به هنگام افزودن به ترکیب پاک کننده‌ها است لذا جستجو برای یافتن منابع آنزیمی و آنزیم‌های قلیایی دارای اهمیت بسیاری می‌باشد. هدف از انجام این مطالعه بررسی جداسازی باسیلوس قلیا‌دوست از خاک و امکان تولید آنزیم پروتئاز قلیایی از سوش جدا شده و خالص‌سازی آنزیم تولید شده بود. مواد و روش‌ها: عملیات جداسازی و تخلیص باسیلوس قلیا دوست از نمونه‌های خاک با استفاده از کشت در محیط اختصاصی با هدف شناسایی فعالیت پروتئازی اولیه و سپس تخلیص سویه‌های دارای فعالیت پروتئازی انجام گردید. پس از آن گونه باسیلوس 5-2 در محیط مناسب با شرایط معین کشت داده شد. و خالص‌سازی آن از طریق: 1- رسوب‌دهی فاز آنزیمی از طریق اشباع‌سازی با آمونیوم سولفات 55%. 2- تغلیظ توسط اولترافیلتراسیون 3- کروماتوگرافی تعویض کاتیونی توسط رزین کربوکسی‌متیل سلولز صورت گرفت. در تمام مراحل فعالیت پروتئاز قلیایی از طریق هیدرولیز سوبسترای کازئین در10 pH برای مدت زمان مشخص و سپس اندازه‌گیری محصول پروتئولیز(میزان معادل تیروزین) در طول موج 275 نانومتر انجام می‌گرفت. یافته‌ها: با مقایسه خصوصیات بیوشیمیایی و تاکسونومیک ، باسیلوس 5-2 با باسیلوس آلکالوفیلیک تطابق داشت. هم‌چنین این سویه در pH های قلیایی دارای فعالیت پروتئولیتیک و آمیلولیتیک بود ولی فعالیت ژلاتینولیتیک نداشت. پیشرفت خالص سازی با روش الکتروفورز روی ژل پلی‌آکریل‌آمید ( PAGE ) بررسی و جرم ملکولی آنزیم با روش SDS-PAGE و با کمک استانداردهای پروتئینی معادل 24700 دالتون معین گردید. نتیجه‌گیری: پس از اتمام خالص‌سازی راندمان کل 24% و مرتبه خالص‌سازی 50 بار تعیین شد که راندمان خالص‌سازی نهایی به دست آمده مشابه راندمان به دست آمده در سایر تحقیقات بود. به نظر می‌رسد ملکول این آنزیم یک ملکول منومر باشد چون میزان تحرک الکتروفورتیک تک باند‌های به دست آمده در PAGE و SDS-PAGE مشابه یکدیگر بود. واژه‌های کلیدی: پروتئاز قلیایی، باسیلوس قلیا‌دوست، خالص‌سازی، فعالیت ویژه آنزیمی |
|
| کلیدواژه‌های فارسی مقاله |
|
|
| عنوان انگلیسی |
Alkaline Protease Production and its Purification from a Soil Separated Alkalophilic Bacillus |
|
| چکیده انگلیسی مقاله |
|
|
| کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله |
|
|
| نویسندگان مقاله |
حمیدرضا فلاحت پیشه | hr. falahatpisheh
کارشناس ارشد گروه آموزشی بیوشیمی و عضو هیأت علمی دانشکده بهداشت، دانشگاه علوم پزشکی تهران تلفن 22376426-021، فاکس 22360660-021
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی تهران (Tehran university of medical sciences)
دکتر محمود جلالی | m. jalali
دانشیار گروه آموزشی بیوشیمی، دانشکده بهداشت، دانشگاه علوم پزشکی تهران
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی تهران (Tehran university of medical sciences)
دکتر ناصر بادامی | n. badami
دانشیار گروه آموزشی میکروبیولوژی، دانشکده بهداشت، دانشگاه علوم پزشکی تهران
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی تهران (Tehran university of medical sciences)
نادیا مردانی | n. mardani
کارشناس گروه آموزشی بهداشت محیط، دانشکده بهداشت، دانشگاه علوم پزشکی تهران
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی تهران (Tehran university of medical sciences)
|
|
| نشانی اینترنتی |
http://journal.rums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-163-1&slc_lang=fa&sid=fa |
| فایل مقاله |
اشکال در دسترسی به فایل - ./files/site1/rds_journals/38/article-38-329078.pdf |
| کد مقاله (doi) |
|
| زبان مقاله منتشر شده |
fa |
| موضوعات مقاله منتشر شده |
تغذیه |
| نوع مقاله منتشر شده |
پژوهشی |
|
|
|
برگشت به:
صفحه اول پایگاه |
نسخه مرتبط |
نشریه مرتبط |
فهرست نشریات
|