این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
فیض، جلد ۲۰، شماره ۵، صفحات ۴۴۷-۴۵۳
عنوان فارسی طراحی، ترانسفورماسیون و تکثیر ایزوفرم نوترکیبVEGF۱۱۱b در E. coli Top۱۰ برای تولید داروی نوترکیب
چکیده فارسی مقاله سابقه و هدف: سنتز پروتئین­های نوترکیب با خاصیت مهار گیرنده­ های رشد در تومورهای سرطانی یکی از راه­ های جدید درمان سرطان است. هدف مطالعه حاضر طراحی و کلون ایزوفرم نوترکیبVEGF111b در وکتور pBudCE4.1 و بررسی سازگاری این سازه با باکتری E. coli Top10 جهت تولید داروی نوترکیب است. مواد و روش ­ها: ایزوفرم جدید VEGF111b با استفاده از توالی­های موجود در بانک­های ژنی و نرم­افزار 7 oligoطراحی شده و توسط آنزیم­های BGLII و KpnI بریده شده و در پایین دست پروموتور EF-1 در وکتور pBudCE4.1 کلون شد. وکتور نوترکیب pBud.VEGF111b توسط روش کلرید کلسیم در باکتری E. coli Top10 ترانسفورم شد. جداسازی باکتری­ های نوترکیب در محیط LBA حاوی غلظت 3/0 و 5/0 درصد آنتی­بیوتیک زئوسین انجام شد. در مرحله آخر وکتور نوترکیب با استفاده از کیت استخراج DNA از ژل (Thermo K0513) استخراج شده و وجود قطعه نوترکیب VEGF111b توسط هضم آنزیمی و تعیین توالی تائید شد. نتایج: الحاق قطعه 111b در جایگاه مورد نظر تائید شد. تمامی کلونی­های E. coli Top10 مشاهده شده در محیط حاوی غلظت 0/5 درصد زئوسین حاوی قطعه نوترکیب VEGF111b بودند و در غلظت 0/3 درصد زئوسین، 61/9 درصد کلونی نوترکیب مشاهده شد. وجود توالیVEGF111b در باکتری ­های نوترکیب توسط هضم آنزیمی و تعیین توالی تائید شد. نتیجه گیری: مطالعه حاضر گامی مهم در جهت تولید داروی نوترکیبVEGF111b و بررسی عملکرد ضد سرطانی این پروتئین است. وکتورpBudCE4.1 با دارا بودن 2 جایگاه کلونینگ و 8 جایگاه برش آنزیمی کاندید مناسبی برای کلونینگ و بیان پروتئین­ های نوترکیب در E. coli Top10 است. 
کلیدواژه‌های فارسی مقاله E. coli ، پروتئین نوترکیب، VEGF111b
عنوان انگلیسی Design, transformation and proliferation of VEGF111b recombinant isoform in Escherichia coli Top10 in order to produce recombinant drugs
چکیده انگلیسی مقاله Background: The synthesis of recombinant proteins with the aim of inhibiting the tumor receptors is one of the new approaches in cancer treatment. The aim of this study was to design and clone the VEGF 111b recombinant isoform in pBudCE4.1 vector and assess its compatibility with E.coli Top10 in order to produce some recombinant drugs. Materials and Methods: The VEGF111b new isoform designed using gene sequences available in the databases and oligo 7 software was digested by BglII and KpnI enzymes. Then it was cloned at downstream of the EF-1 promoter in the pBudCE4.1vector. Isolation of recombinant bacteria was done in LBA medium with the concentration of Zeocin antibiotic (3% and 5%). In the final step, the recombinant vector was extracted using DNA gel extraction kit and VEGF111b recombinant fragment was confirmed by enzyme digestion and sequencing. Results: The ligation of 111b fragment in expected site was confirmed. The entire E.coli Top10 colonies were observed in Zeocin medium (5%) containing recombinant VEGF111b fragment and recombinant colonies (61.9%) were observed at Zeocin medium (3.0%). The existence of VEGF111b sequences in recombinant bacteria was confirmed by enzyme digestion and sequencing. Conclusion: The present study is an important step in the production process of VEGF111b recombinant protein and evaluating its anticancer effect. Moreover, the pBudCE4.1 vector containing 2 cloning sites and 8 enzyme excision sites is a good candidate for cloning and expression of recombinant proteins in E.coli TOP10.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله E.coli, Recombinant Protein, VEGF111b
نویسندگان مقاله مرتضی صادقی | morteza sadegi
genetic research center, baqiyatallah university of medical sciences, tehran, i. r. iran.
تهران، میدان ونک، خیابان ملاصدرا، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله، بخش ژنتیک
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله (Baqiyatallah university of medical sciences)

زهره حجتی | zohreh hojjati


نشانی اینترنتی http://feyz.kaums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-176-1304&slc_lang=fa&sid=fa
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده medicine, paraclinic
نوع مقاله منتشر شده پژوهشی
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات