این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
پژوهش در پزشکی، جلد ۴۸، شماره ۲، صفحات ۲۷-۳۶
عنوان فارسی مطالعه مولکولی و کلونینگ ژن dt کورینه باکتریوم در سلول مستعد به منظور تهیه واکسن
چکیده فارسی مقاله
 مقدمه و هدف: کورینه باکتریوم دیفتریه باکتری هوازی، گرم مثبت و غیر اسپورزا است. توکسین دیفتری (dt)، پروتئینی با سمیت بسیار بالا بوده و در اثر آلودگی باکتری به کورینه فاژ خاصی که حامل tox است، تولید می گردد. هدف از مطالعه حاضر کلونینگ ژن dt کورینه باکتریوم در سلول مستعد E.coli XL1blue  به منظور تولید پروتئین نوترکیب و استفاده از این پروتئین در تحقیقات بعدی  در سال 1401 در موسسه پژوهشی پاسارگارد بود.
مواد و روش کار: در این مطالعه ، یک نمونه  DNA سویه واکسینال کورینه باکتریوم دیفتریه 8PW تحت سویه 2000CN از موسسه رازی تهران تهیه شد. برای شناسایی ژن dt، DNA سویه باکتری با استفاده از پرایمر های اختصاصی در روش واکنش زنجیره ای پلیمراز   (PCR) تکثیر یافت. با استفاده از کیت TA-کلونینگ ژن مذکور در سلول مستعد E.coli XL1blue  انجام شد. رسم درخت فیلوژنی با استفاده از تعیین توالی ناحیه ژنی srRNA  16 برای سویه باکتری مورد استفاده با نرم ‌افزارclustalX   و  Mega5  انجام شد.
یافته ها: DNA سویه کورینه باکتریوم دیفتری حامل ژن dt بودند. انجام TA-کلونینگ ژن dt با روش های Real Time PCR، تعیین توالی محصول PCR، حضور کلنی های سفید آبی و تکثیر با پرایمر M13  تایید شد. نتیجه تعیین توالی ناحیه ژنی SrRNA 16 تایید کننده کورینه باکتریوم دیفتری بود.  
نتیجه گیری: در این بررسی ژن dt   در وکتور E.coli XL1blue  کلون و سپس تایید شد و در جهت آماده­سازی برای ابزار  پروتئین نوترکیب ، و همچنین بعنوان یک آنتی ژن قوی در تحریک سیستم ایمنی می­تواند در نظر گرفته شود. این ژن می تواند در مطالعات بعدی مورد استفاده قرار گیرد.
mouseout="msoCommentHide('_com_1')" onmouseover="msoCommentShow('_anchor_1','_com_1')">
کلیدواژه‌های فارسی مقاله دیفتری، کورینه باکتریوم، ژن dt، کلونینگ.
عنوان انگلیسی Molecular Study and Cloning of the dt Gene of Corynebacterium in Susceptible Cells in Order to Prepare a Vaccine
چکیده انگلیسی مقاله Background and Aim: Corynebacterium diphtheriae is an aerobic, gram-positive, non- sporulating bacterium. Diphtheria toxin (dt) is a highly toxic protein and produced as a result of bacterial infection with a special corynephage that carries tox. The aim of the present study was to clone the dt gene of Corynebacterium in susceptible E.coli XL1blue cell in order to produce a recombinant protein and use this protein in subsequent research in 2022 at Pasargård Research Institute.
Methods: In this Cross- sectional study, a DNA sample of Corynebacterium diphtheria vaccinal strain PW8 Sub- strain 2000CN was prepared from Razi Institute in Tehran. To identify the dt gene, the DNA bacterial strain was amplified using specific primers in the polymerase chain reaction (PCR) method. Using the TA- cloning kit, the dt gene was cloned in the susceptible E.coli XL1blue cell. The phylogeny tree for the bacterial strain was performed by DNA sequencing of the 16 srRNA gene region using clustalX and Mega5 software.
Results: The DNA of Corynebacterium diphtheria carried the dt gene. TA- cloning of the dt gene was confirmed by the Real- Time PCR method, DNA sequencing of the PCR product, the presence of white- blue colonies, and amplification with an M13 primer. The result of DNA sequencing of the 16 srRNA gene region was confirmed as Corynebacterium diphtheria.
Conclusion: In this study, the dt gene was cloned in the E.coli XL1blue vector and then confirmed, and it can be considered as a powerful antigen for the preparation of the recombinant protein tool, as well as for stimulating the immune system. This gene can be used in future studies.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله Diphtheria, Corynebacterium, dt gene, Cloning
نویسندگان مقاله سمانه صادقی | Samaneh Sadeghi
Department of Cellular and Molecular Biology, Sirjan Branch, Islamic Azad University, Sirjan, Iran.
گروه زیست‌شناسی سلولی و مولکولی، واحد سیرجان، دانشگاه آزاد اسلامی، سیرجان، ایران.

نوشین خندان دزفولی | Nooshin Khandan Dezfully
Department of Microbiology, Sirjan Branch, Islamic Azad University, Sirjan, Iran.
گروه میکروبیولوژی، واحد سیرجان، دانشگاه آزاد اسلامی، سیرجان، ایران.

کیومرث امینی | Kumars Amini
Department of Microbiology, School of Basic Sciences, Saveh Branch, Islamic Azad University, Saveh, Iran.
گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم پایه، واحد ساوه، دانشگاه آزاد اسلامی، ساوه، ایران.

نشانی اینترنتی http://pejouhesh.sbmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-4743-1&slc_lang=fa&sid=1
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده میکروب‌شناسی
نوع مقاله منتشر شده پژوهشی
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات