تحقیقات دامپزشکی، جلد ۶۳، شماره ۱، صفحات ۱۱-۱۶
عنوان فارسی استفاده از روش Nested-PCR ‌برای تشخیص آلودگی کشت‌های سلولی به ویروس pestivirus
چکیده فارسی مقاله در این مطالعه یک روش Nested-PCR ‌برای تشخیص دو ویروس BVDV ‌از سویه NADL ‌بهینه سازی گردید. در آزمایش RT-PCR، قسمتی از منطقه غیر قابل ترجمه ناحیه ‌‌'5 ‌ویروس به طول 249 جفت باز تکثیر شد. محصول PCR در وکتور R/T57pTZ کلون گردید و نتیجه تعیین ردیف اسیدهای نوکلوتیدی آن اختصاصی بودن آزمایش را تایید نمود. سپس پرایمرهای داخلی انتخاب و آزمایش Nested-PCR ‌انجام گردید و یک قطعه DNA ‌به طول 155 جفت باز تکثیر شد. میزان حساسیت آزمایش RT-PCR، 50TCID 104 ‌و میزان حساسیت آزمایش Nested-PCR ‌در تشخیص ویروس BVDV در کشت سلول، 50TCID102 تعیین گردید. تعداد 7 نمونه از کشت‌های سلولی با سه روش PCR, ELISAو ‌ Nested-PCR ‌مورد آزمایش قرار گرفتند. نتایج نشان داد که حساسیت روش‌های مولکولی در تشخیص ویروس در نمونه‌ها نسبت به روش ELISA ‌بیشتر می‌باشد. ‌ ‌
کلیدواژه‌های فارسی مقاله آلودگی کشت سلولی،
عنوان انگلیسی DETECTION OF PESTIVIRUS CONTAMINATION IN CELL CULTURES BY NESTED-PCR
چکیده انگلیسی مقاله In this study a nested-PCR assay was optimized for detection of two BVDV biotype of NADL strain. A part of 5' non-coding region of virus, 249 bp in size, was amplified in RT-PCR. PCR product was cloned in a pTZ57R/T vector and sequencing results confirmed the specificity of the test. Internal primers were designed and a 155 bp DNA fragment was amplified in nested-PCR. The sensitivity of RT-PCR and nested-PCR for detection of virus in cell culture were found to be 104 TCID50 and 102 TCID50, respectively. Seven cell cultures were tested for BVDV contamination using ELISA, RT-PCR and nested-PCR. Results indicate that sensitivity of molecular tests for detection of virus in cell culture samples is higher than ELISA.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله cell culture contamination, PCR, Pestivirus
نویسندگان مقاله سید علی قرشی | seyed ali
گروه میکروبیولوژی، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری
سازمان اصلی تایید شده: پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری

مرتضی دلیری جوپاری | daliri joupari
گروه میکروبیولوژی، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری
سازمان اصلی تایید شده: پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری

دینا مرشدی |
گروه میکروبیولوژی، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری
سازمان اصلی تایید شده: پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری

ترانه حاجیان |
گروه میکروبیولوژی، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری
سازمان اصلی تایید شده: پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری

محسن لطفی |
موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی کرج
سازمان اصلی تایید شده: موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی (Razi vaccine and serum research institute)

نشانی اینترنتی http://jvr.ut.ac.ir/article_23911_526a9e6b9f5ee64b669b6c8f8692f321.pdf
فایل مقاله اشکال در دسترسی به فایل - ./files/site1/rds_journals/699/article-699-311534.pdf
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات