تحقیقات دامپزشکی، جلد ۷۱، شماره ۱، صفحات ۵۷-۶۴
عنوان فارسی جداسازی، تخلیص و بررسی خاصیت باکتری کشی کال پروتکتین از نوتروفیل های خون گاو
چکیده فارسی مقاله زمینه مطالعه: نوتروفیل‌های گاو پپتیدهای یاخته‌کشی تولید می‌کنند که باعث از بین بردن میکروارگانیسم‌های قارچی و باکتریایی از جمله عامل ماستیت می‌شوند. هدف: استخراج و تخلیص پروتئین P7/P23 گاوی و بررسی فعالیت ضد باکتریایی آن علیه باکتری‌های Staphylococcus aureus، Aeromonas hydrophila و Yersinia ruckeri بود. روش کار: ابتدا یاخته‌های نوتروفیل گاو توسط روش رسوب‌دهی با دکستران و سانتریفیوژ روی فایکول از سایر یاخته‌های خون سالم جداسازی گردیدند. سپس زنده‌مانی آنها با کمک تریپان بلو تعیین و پس از خرد کردن آنها با سونیکاتور مقدار پروتیئن‌های تام سیتوزولی توسط سانتریفیوژ جداسازی شد. در مرحله بعد، پس از جداسازی به منظور تخلیص ابتدا دیالیز و سپس کروماتوگرافی تعویض یونی دو مرحله‌ای صورت گرفت. بررسی فعالیت ضد یاخته‌ای آن‌، با روش‌های تعیین حداقل غلظت مهار کنندگی، حداقل غلظت کشندگی و آزمون انتشار در آگار بررسی شد. نتایج: یاخته‌های نوتروفیل‌ با زنده‌مانی بیشتر از 95% جداسازی شدند. نتایج کروماتوگرافی و الکتروفورز ژل پروتئین نشان داد که پروتئین هترودیمر P7/P23 با موفقیت طی دو مرحله تخلیص شده است (مرحله اول حدود 60% و در مرحله دوم با خلوص بیشتر از 95%). وزن مولکولی هر کدام از منومرهای کوچک و بزرگ به ترتیب kDa‌‌7 و 23 تعیین شد. پروتئین تخلیص شده دارای فعالیت باکتری کشی بوده و تأثیر آن بر یرسینیا روکری (µg/ml 64) بیش‌تر از دو باکتری دیگر بود. نتیجه‌گیری نهایی: پروتئین تخلیص شده در طی فرایند تخلیص فعالیت خود را حفظ می‌کند. به علاوه فعالیت ضد باکتریایی نوتروفیل می‌تواند ناشی از پروتئین P7/P23  باشد.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله ضد یاخته، کال پروتکتین، جداسازی، نوتروفیل،
عنوان انگلیسی Isolation, purification and anti-bacterial property of calprotectin from bovine neutrophil
چکیده انگلیسی مقاله BACKGROUND: It is believed that bovine neutrophils contain several peptides and protein which exhibit antimicrobial activity against microorganisms such as fungi and bacteria. Objectives: The purpose of this study was to isolate and purify a potential antibacterial protein from bovine neutrophil and test its anti bacterial activity. Methods: Neutrophils were isolated from bovine blood using dextran sedimentation and centrifugation on Ficoll-Hypaqe. Cell viability is examined by trypan blue dye exclusion method. Protein extract was then dialyzed and applied onto ion exchange chromatography for further purification, and its potential cytostatic activity was examined against Staphylococcus aureus, Aeromonas hydrophila and Yersinia ruckeri. Results: Viability of isolated neutrophil was over 95%, chromatographic results and SDS-PAGE analysis exhibited that neutrophil cytosolic proteins were fractionated so that the purification of P7/P23 was almost 60% in the first step and purification was completed in the second phase. Using calibration curve according to molecular mass markers, the relative molecular mass of P7 and P23 determined as 7 kDa and 23 kDa, respectively. Also, results showed that this protein has antibacterial activity and has higher bactericidal activity against Y. ruckeri. Conclusions: It could be concluded that purification of P7/P23 sustains its biological activity and has wide range antibacterial activity. Moreover, taking all data into account may suggest that the cytostatic activity of neutrophil, to some extent, results from P7/P23 protein which is abundant in the cytosole.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله antibacterial activity, Isolation, neutrophil, P7/P23
نویسندگان مقاله مهدی ایمانی |
گروه علوم پایه، دانشکده دامپزشکی دانشگاه ارومیه، ارومیه- ایران
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه ارومیه (Urmia university)

امیر توکمه چی |
گروه میکروبیولوژی، دانشکده دامپزشکی دانشگاه ارومیه، ارومیه- ایران
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه ارومیه (Urmia university)

نشانی اینترنتی http://jvr.ut.ac.ir/article_57401_2ce56aa95f79ae15f3c7860c95992a22.pdf
فایل مقاله اشکال در دسترسی به فایل - ./files/site1/rds_journals/699/article-699-280259.pdf
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات