این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
توسعه آبزی پروری، جلد ۱۵، شماره ۴، صفحات ۴۷-۵۵
عنوان فارسی بیوتکنولوژی انتقال ژن در ماهی زبرا به عنوان مدل تحقیقاتی انتقال ژن در آبزیان پرورشی
چکیده فارسی مقاله جهت ایجاد ماهی رنگی زینتی زبرا، واکنش زنجیره­ای پلیمراز (PCR) با استفاده از آغازگرهای طراحی شده برای پیشبر دو ژن انتخاب شده در سلول­های عضلاتی و همسانه­سازی این قطعات ژنی در وکتور Tol2 که خود حاوی ژن پروتئین فلوئورسنت سبز (GFP) بود در ناحیه خوانش باز (ORF) صورت گرفت. به ترتیب قطعات 2000 و 2300 جفت بازیِ ناحیه پیشبر ژن­های MYLZ2 و CKMB بوسیله واکنش زنجیره­ای پلیمراز تکثیر شده، در وکتور بیانی Tol2 دارای جایگاه برشی آنزیم SalI همسانه­سازی شد و به باکتری اشریشیاکلی (E. coli) سویه Dh5α انتقال یافت. همسانه­های مثبت توسط colony PCR با استفاده از آغازگرها مورد بررسی قرار گرفت و برای استخراج پلاسمید نوترکیب کشت شد. پلاسمید نوترکیب استخراج شده توسط هضم آنزیمی SalI بررسی شد و به کمک آغازگرهای عمومی تعیین توالی گردیدند. در این مطالعه، به ترتیب قطعات 2000 و 2300 جفت بازیِ راه انداز ژن­های MYLZ2 و CKMB در وکتور بیانی Tol2 همسانه­سازی شدند که تایید آن با استفاده از واکنش زنجیره­ای پلیمراز، توالی­یابی و هضم آنزیمی صورت گرفت. همچنین، پلاسمید نوترکیب کشت داده شد و برای تزریق به همراه یک رونوشت سنتتیک خالص­سازی گردید. جنین­های تک سلولی تزریق شده (توسط پلاسمید نوترکیب و رونوشت) به وسیله میکروسکوپ فلوئورسنس برای بررسی بیان GFP آزمایش شدند و مشخص شد که بیان GFP در سلول­های عضلانی برخی از نتاج نسل F0 روی داده است. پلاسمیدهای نوترکیب شده با استفاده از پیشبرهای مختص سلول­های عضلانی (MYLZ2 و CKMB) قادر به القاء بیان GFP در برخی از جنین­های نسل F0 به صورت موقت بودند و از این رو می توانند جهت تثبیت بیان در نسل­های بعدی ماهی استفاده شوند.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله همسانه‌سازی، ماهی زبرا تراریخت رنگی، وکتور Tol2 نوترکیب، رونوشت
عنوان انگلیسی Gene transfer biotechnology in zebrafish as a gene transfer research model in farmed aquatic animals
چکیده انگلیسی مقاله The polymerase chain reaction (PCR) was applied to create the colored transgenic ornamental zebrafish with the specific primers designed for muscle promoter of two genes and genes fragments cloned in Tol2 vector containing GFP gene in the ORF region. The 2000 bp and 2300 bp fragments of MYLZ2 and CKMB promoters' genes respectively were amplified by PCR, cloned into Tol2 plasmid expression vector containing SalI restriction enzyme site and transformed into E. coli Dh5α. Positive clones were tested for having fragments by colony PCR with anchor primers and subcultured for extracting recombinant plasmid miniprep. The extracted recombinant plasmid was tested with SalI enzyme digestion and sequenced with universal primers. Positive recombinant plasmids were applied for injection with transcript produced synthetically in the lab into zebrafish one-cell embryo. In this study, 2000 bp and 2300 bp fragments of MYLZ2 and CKMB promoters, respectively, were cloned in an expression vector Tol2 and confirmed by PCR, sequencing and enzymatic digestion. Also, recombinant plasmid was subcultured and purified for injection with a synthetic transcript. One-cell embryos injected by coinjection materials (recombinant plasmid and transcript) were tested by fluorescence microscope for positive GFP expression, where a few offspring of F0 generation were positive for GFP expression in their muscles. Recombinant plasmids with muscle-specific promoters (MYLZ2 and CKMB) were able to induce expression of GFP in some F0 embryos in a transient form and could be applied for consolidation in the next fish generation. 
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله cloning, transgenic colorful zebra fish, recombinant Tol2 vector, transcript
نویسندگان مقاله شیرین جمشیدی | ُShirin Jamshidi
International Sturgeon Research Institute, Agricultural Research, Education and Extension Organization (AREEO), Rasht, Iran
انستیتو تحقیقات بین الملی ماهیان خاویاری

اشکان بنان | Ashkan Banan
Department of Fisheries and Environmental Sciences, Lorestan University, Khorramabad, Iran
دانشگاه لرستان

نشانی اینترنتی http://aqudev.liau.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-497-1&slc_lang=fa&sid=1
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده تخصصی
نوع مقاله منتشر شده پژوهشی
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات