این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
ژنتیک نوین، جلد ۱۱، شماره ۱، صفحات ۱۴۳-۱۴۸
عنوان فارسی همسانه سازی و انتقال ژن AtCDPK۵ به توتون
چکیده فارسی مقاله تنش‌های محیطی مهم‌ترین عامل کاهش عملکرد محصولات زراعی هستند. ژن AtCDPK5 یکی از ژن‌های خانواده‌ بزرگ CDPK در گیاهان است که نقش مهمی در پاسخهای دفاعی گیاه نسبت به تنش‌های غیر زیستی دارد. هدف از این پژوهش همسانه سازی ژن AtCDPK5و انتقال آن به توتون به‌منظور افزایش تحمل به تنش‌های غیر زیستی بود. بدین منظور ابتدا RNA از برگ گیاه آرابیدوپسیس استخراج و cDNA ساخته شد. ژن AtCDPK5 توسط انجام واکنش زنجیره‌ای پلیمراز با آغازگرهای اختصاصی تکثیر و به ناقل pGEM-T وارد و در باکتری E.coli ‌کلون شد. سپس قطعه‌ ژن مورد نظر درون ناقل pBI121 قرار داده شده و در باکتری E.coliکلون شد. یکپارچگی سازه حاوی ژن AtCDPK5 توسط انجام کلونی PCR تایید شد و توالی‌یابی قطعه، وجود ژن را اثبات کرد. پلاسمید نوترکیب حاصل از طریق تکنیک اگرواینفکشن به گیاه توتون منتقل شد. پس از هم‌کشتی با اگروباکتریوم، رشد ریزنمونه‌های گیاه توتون در محیط انتخابی حاوی غلظت‌های مختلف کانامایسین و سفوتاکسیم تراریختی آن‌ها را تایید کرد. گیاهچه‌های تراریخت به محیط ریشه‌زایی و سپس به گلدان منتقل شدند. واکنش زنجیره‌ای پلیمراز با آغازگرهای اختصاصی تراریخت بودن گیاهان توتون را در سطح DNA وcDNA تایید کرد.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله تراریزش،ژن AtCDPK ،توتون،همسانه سازی
عنوان انگلیسی Cloning and transformation of AtCDPK to tobacco
چکیده انگلیسی مقاله Enviromental stresses are the most important factors limiting crops production worldwide. Being a member of CDPK family, AtCDPK5 gene plays an important role in plant defense responses to abiotic stresses. The objective of this study was to clone AtCDPK5 and transfer it to tobacco in order to increase abiotic stress resistance. Total RNA extracted from Arabidopsis thaliana leaves and converted into cDNA. AtCDPK5 was amplified by PCR with specific primers and transformed to pGEM-T easy vector and cloned in E.coli. The integrity of the construct was verified by colony PCR on the clones grown in LB medium containing Ampycilin. The gene fragment was inserted into pBI121 vector and then cloned in E.coli. The clones were grown in LB medium containing kanamycin and the integrity of the construct was verified by colony PCR. The recombinant plasmid was introduced into Agrobacterium tumefaciens. The constructions were transformed by Agroinfection method into of tobacco explants. After plant adaptation period, plants were moved into pots and kept in greenhouse. Transgenic plants were selected by Kanamycin, Sephotaxim and Rifampsin resistance. Trasformation was also verified on cDNA level by PCR with specific primers.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله AtCDPK gene, Cloning, ,Tobacco, Transformation
نویسندگان مقاله رویا حقیقی | رویا حقیقی


ولی اله محمدی | ولی اله محمدی


علیرضا عباسی | علیرضا عباسی


نشانی اینترنتی http://mg.genetics.ir/browse.php?a_code=A-10-109-412&slc_lang=fa&sid=1
فایل مقاله اشکال در دسترسی به فایل - ./files/site1/rds_journals/1516/article-1516-1988779.pdf
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات