این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
مجله دانشگاه علوم پزشکی فسا، جلد ۲، شماره ۳، صفحات ۱۳۵-۱۴۱
عنوان فارسی الحاق ژنی زیرواحد B سم کلرا (ctB) با زیرواحد B انتروتوکسین شیگلا دیسانتری تیپ ۱ (stxB) ، همسانه سازی و بیان آن در باکتری E .coli
چکیده فارسی مقاله زمینه و هدف: یکی از مهم‌ترین فاکتورهای بیماری‌زای اصلی در شیگلا دیسانتری تیپ 1، انتروتوکسین شیگلا یا STxمی‌باشد، که از یک زیر واحد سمی آنزیماتیک به نام STxA و یک زیر واحد پنتامریک متصل شونده به رسپتور به نام زیر واحد B یا STxB تشکیل شده است. زیر واحد STxB مسئول اتصال زیر واحد سمی به گیرنده سطح سلولی Gb3 بوده و در نهایت باعث ورود سم به درون سلول و اثرات آن می‌شود. زیر واحد B سم کلرا (CTB) به عنوان ادجوانت مخاطی قوی برای واکسیناسیون شناخته شده و همجوشی ژنتیکی آن با هترو آنتی ژن هایی مثل stxB باعث تقویت ایمنی همورال و مخاطی و پاسخ ایمنی علیه آن آنتی ژن می‌گردد. مواد و روش‌ها: در این مطالعه ژن‌های ctB و stxB پس از طراحی پرایمر به وسیله PCR تکثیر و در وکتور pGEMهمسانه‌‌سازی شدند. ژن stxB به همراه لینکر غیرفورینی به روش برش آنزیمی با ژن ctB در وکتور pGEM الحاق شدند و در نهایت قطعه کایمریکctB-stxB در وکتور بیانی pET28a(+) زیر همسانه‌سازی گردید. پروتئین کایمر تحت القای IPTG بهینه‌سازی و به وسیله تکنیک SDS-PAGE و وسترن بلات مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج: قطعه کایمریک ctB-stxBدر وکتور بیانی pET28a(+) به وسیله توالی یابی، PCR و آنالیز آنزیمی تأیید گردید. همچنین پروتئین تولیدی به وسیله SDS-PAGE و وسترن بلات مورد تأیید قرار گرفت. نتیجه گیری: پروتئین نوترکیب تولیدی بعد از بررسی ایمنی زایی می تواند به عنوان کاندیدی برای واکسن مخاطی موثر و نوین علیه باکتری شیگلا دیسانتری تیپ 1 در نظر گرفته شود.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله شیگلا دیسانتری تیپ 1، STxB، CTB، ادجوانت، لینکر غیر فورینی.
عنوان انگلیسی Fusion of Cholera toxin B subunit (ctxB) with Shigella dysenteriae type I toxin B subunit (stxB), Cloning and Expression that in E. coli
چکیده انگلیسی مقاله Background and Objective: Shiga toxin (STx) is the main virulence factor in Shigella Dysenteriae type I and is composed of an enzymatic subunit STxA monomer and a receptor-binding STxB homopentamer. Shigella toxin B subunit (STxB) is a non-toxic homopentameric protein responsible for toxin binding and internalization into target cells by interacting with glycolipid (Gb3). Cholera toxin B subunit (CTB) has been known as a mucosal adjuvant for vaccines and genetic fusions of CTB with several hetroantigens such as stxB and can increase humoral and mucosal immunity response.Materials and Methods: In this study, after primer designing, the ctxB and stxB genes were amplified by PCR and cloned into the pGEM-T vector. The stxB gene with a nonfurin linker was fused to the ctB gene in the pGEM vector via the restriction enzyme method and thereafter the fused genes of ctB-stxB were subcloned in the pET28a(+) as an expression vector. The expressed chimeric protein was induced with IPTG and evaluated via the SDS.PAGE and Western blot techniques. Result: The pET28a (+)/ctxB-stxB expression vector was confirmed by endonuclease digestion, PCR, and sequence analysis. The CTB-STB fusion protein was confirmed by the SDS-PAGE and Western-blot. Conclusion: The CTB-STB recombinant protein can be used as a new and desirable mucosal vaccine for Shigella Dysenteriae type I.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله حمید معدنچی | hamid madanchi


حسین هنری | hossein honari


صادق صفایی | sadegh safaei


علی صیادمنش | ali sayadmanesh


نشانی اینترنتی http://journal.fums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-4&slc_lang=fa&sid=fa
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده میکروبیولوژی
نوع مقاله منتشر شده پژوهشی
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات