این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
مجله دانشگاه علوم پزشکی فسا، جلد ۴، شماره ۴، صفحات ۳۸۲-۳۹۱
عنوان فارسی به کارگیری روش سریع و حساس Real time PCR در تشخیص ناخالصی های DNA در اینترفرون نوترکیب
چکیده فارسی مقاله  زمینه و هدف: اینترفرون‌ها خانواده‌ای از سایتوکاین‌ها هستند که در پاسخ ایمنی به عفونت‌های ویروسی نقش اساسی دارند. در جریان تولید اینترفرون نوترکیب در میزبان بیولوژیک، قطعاتی از اسیدنوکلئیک میزبان وارد محصول می‌شود. به علت وجود محدودیت‌های روش‌های قبلی در تشخیص این آلودگی‌ها، هدف از این مطالعه، استفاده از روش مولکولی سریع و حساس Real time PCR در این ناخالصی‌ها می‌باشد. مواد و روش‌ها: ابتدا با استخراج DNA از میزبان باکتریایی و تهیه رقت‌های متوالی از آن، واکنش Real time PCR به کمک رنگ SYBR Green I انجام گرفت و منحنی استاندارد رسم گردید. پس از استخراج DNA از اینترفرون و انجام واکنش PCR، میزان DNA به کمک منحنی استاندارد، تعیین گردید. نتایج: بررسی‌های انجام شده بر روی چند نمونه اینترفرون، میزان آلودگی DNA را حدود 02/0 پیکوگرم در هر دوز محصول نشان داد. همچنین پرایمرهای طراحی شده در واکنش فوق، هیچ گونه واکنشی با یکدیگر و سایر عوامل مداخله کننده نشان ندادند. نتیجه‌گیری: مطالعه فوق برای اولین بار در ایران بهینه سازی شد و نشان داد که تکنیک Real time PCR می‌تواند به عنوان یک روش کاربردی و بسیار دقیق در مراکز تولیدی جهت تشخیص ناخالصی‌های DNA ناشی از میزبان، در اینترفرون و سایر محصولات دارویی نوترکیب به کار برده شود.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله
عنوان انگلیسی Application of Rapid and Sensitive Real Time PCR Technique in Detection of DNA Impurities in Recombinant Interferon
چکیده انگلیسی مقاله  Background & Objective: Interferon belongs to a family of cytokines, which has the most important role in the innate immune response to virus infections. While producing recombinant interferon in biological host, some pieces of host nucleic acids remain in product. Because of limitations in previous techniques for detection of these impurities, the objective of this study is to use rapid and sensitive Real time PCR method for detecting the impurities. Materials & Methods: First, with DNA extraction from bacterial host cell and preparation of its serial dilutions, SYBR Green-based Real time PCR reaction was held and standard curve was plotted. After DNA extraction from interferon and performing PCR, total DNA amount was determined using standard curve. Results: Studies performed on some interferon samples, revealed that the amount of DNA impurities was about 0.02 pg. per product dose. In addition, the designed primers in the above reaction had no interaction with each other and other interfering agents. Conclusion: For the first time in Iran, this study was set up and it revealed that Real time PCR can be used as a functional and accurate technique in manufacture centers for detection of residual host cell DNA in interferon and other recombinant pharmaceutical products.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله بابک ممنون | babak mamnoon
cellular and molecular research center, faculty of medicine, qazvin university of medical sciences, qazvin, iran.
مرکز تحقیقات سلولی و مولکولی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی قزوین، قزوین، ایران.
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی قزوین (Qazvin university of medical sciences)

تقی ناصرپور فریور | taghi naserpour farivar
cellular and molecular research center, faculty of medicine, qazvin university of medical sciences, qazvin, iran.
مرکز تحقیقات سلولی و مولکولی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی قزوین، قزوین، ایران.
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی قزوین (Qazvin university of medical sciences)

محسن کریمی ارزنانی | mohsen karimi arzenani
molecular medicine department, pasteur institute of iran, tehran, iran.
بخش پزشکی مولکولی، انستیتوپاستور ایران، تهران، ایران.
سازمان اصلی تایید شده: انستیتو پاستور ایران (Pasteur institute of iran)

نشانی اینترنتی http://journal.fums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-238-1&slc_lang=fa&sid=fa
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده بیوتکنولوژی پزشکی
نوع مقاله منتشر شده پژوهشی
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات